NF-κB、MCP-1在糖尿病大鼠腎臟中的表達及舒洛地特的干預作用.pdf

1、目的:
　　 探討核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)在糖尿病腎病(DN)大鼠腎組織中的表達及舒洛地特對其的干預作用。
　　 方法:
　　 健康雄性Wistar大鼠50只,隨機選取10只設為正常對照組(NC組),喂養(yǎng)普通飼料;其余40只大鼠喂養(yǎng)高脂、高糖飼料,4周后,腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ,35mg/kg,溶于PH4.2,0.1mol/L的檸檬酸緩沖液中,冰浴配置),NC組腹腔注

2、射同體積的檸檬酸緩沖液。72h后尾靜脈取血檢測血糖,如≥16.7mmol/L即為造模成功。將成模的40只大鼠隨機分為:糖尿病模型對照組(DM組)、舒洛地特干預組(DMS組)、纈沙坦干預組(DMV組)、舒洛地特與纈沙坦聯(lián)合干預組(DMS+V組),每組10只。DMS組給予舒洛地特10mg.kg-1.d-1肌肉注射、DMV組給予纈沙坦10mg.kg-1.d-1灌胃、DMS+V組給予舒洛地特10mg.kg-1.d-1肌肉注射聯(lián)合纈沙坦10mg.

3、kg-1.d-1灌胃治療。NC組和DM組給予1ml生理鹽水肌肉注射。給藥12周后留取24小時尿液,檢測尿白蛋白、尿肌酐;眼眶靜脈取血檢測血糖、甘油三酯、膽固醇、血肌酐、尿素氮;計算腎臟肥大指數(shù)、肌酐清除率。光鏡下觀察腎組織形態(tài)學變化,免疫組化法檢測腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達。
　　 結(jié)果:
　　 1.實驗結(jié)束時(藥物干預12周后),DM組大鼠血糖、甘油三酯、膽固醇較NC組明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.

4、01);DMS、DMV、DMS+V組大鼠與DM組相比以上各指標均無明顯下降,差異無統(tǒng)計學意義(均P＞0.05),與NC組相比,差異有統(tǒng)計學意義(均P＜0.01)。
　　 2.DM組大鼠24小時尿白蛋白、血肌酐、尿素氮、腎臟肥大指數(shù)較NC組顯著升高(P＜0.01),肌酐清除率較NC組顯著下降(P＜0.01);DMS、DMV、DMS+V組24小時尿白蛋白、血肌酐、尿素氮、腎臟肥大指數(shù)較DM組下降(P＜0.01orP＜0.05),肌酐

5、清除率較DM組升高(P＜0.01);但DMS、DMV、DMS+V組與NC比較,以上各指標差異仍具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01orP＜0.05)。與DMS、DMV組比較,DMS+V組24小時尿白蛋白、血肌酐、尿素氮、腎臟肥大指數(shù)下降(P＜0.01orP＜0.05),肌酐清除率升高(P＜0.01);DMS組與DMV組比較,以上各指標差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 3.光鏡觀察結(jié)果顯示,DM組大鼠與NC組大鼠相比腎小囊腔狹小

6、,系膜細胞增生,系膜基質(zhì)明顯增多,系膜區(qū)面積增加,平均腎小球體積增大(P＜0.01);DMS、DMV、DMS+V組腎臟病理改變較DM組減輕,平均腎小球體積減小(P＜0.01orP＜0.05),以DMS+V組減少最為顯著,但仍較NC組高(P＜0.05);DMV組與DMS組比較,平均腎小球體積稍小,但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 4.免疫組化結(jié)果顯示DM組大鼠腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達較NC組顯著增加(P＜

7、0.01);各干預組大鼠腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達較DM組下降(均P＜0.01),以DMS+V組下降最為顯著,但仍高于NC組(P＜0.01);與DMS、DMV組比較,DMS+V組大鼠腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達下降(P＜0.01orP＜0.05),DMV組與DMS組比較,腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 5.相關(guān)分析結(jié)果顯示,糖尿病大鼠腎組織NF-κBP65的

8、表達與24小時尿白蛋白排泄量呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.584,P＜0.01),與肌酐清除率呈顯著負相關(guān)關(guān)系(r=-0.796,P＜0.01);腎組織NF-κBP65的表達與MCP-1的表達呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.902,P＜0.01);腎組織MCP-1的表達與24小時尿白蛋白排泄量亦呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.680,P＜0.01),與肌酐清除率呈負相關(guān)關(guān)系(r=-0.740,P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.各造模組大

9、鼠均出現(xiàn)血糖、血脂代謝異常,尿白蛋白排泄量增加,腎功能及結(jié)構(gòu)損傷,同時腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達顯著增加。提示炎癥因子NF-κB、MCP-1的異常表達在糖尿病腎病的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。
　　 2.舒洛地特及纈沙坦可減少糖尿病大鼠尿白蛋白排泄量,改善腎功能,減輕腎臟病理損傷,下調(diào)腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達,其作用效果相當,且兩者合用效果具有疊加作用,其作用機制與調(diào)節(jié)糖、脂代謝無關(guān)。提示舒洛地特與纈

10、沙坦可通過抑制糖尿病大鼠腎組織NF-κBP65、MCP-1的表達以延緩糖尿病腎病腎臟結(jié)構(gòu)及功能損害的進展,發(fā)揮不依賴調(diào)節(jié)糖脂代謝的腎臟保護作用,且兩藥合用效果更佳。
　　 3.糖尿病大鼠腎組織NF-κBP65的表達與24小時尿白蛋白排泄量呈正相關(guān)關(guān)系,與肌酐清除率呈顯著負相關(guān)關(guān)系;腎組織MCP-1的表達亦與24小時尿白蛋白排泄量呈正相關(guān)關(guān)系,與肌酐清除率呈顯著負相關(guān)關(guān)系。提示腎組織NF-κBP65、MCP-1的異常表達與糖尿病腎