穩(wěn)定轉染ERα基因對MDA-MB-231乳腺癌細胞活性及IL-8，COX-2和VEGF-C的影響.pdf

1、中山大學博士學位論文穩(wěn)定轉染ERα基因對MDAMB231乳腺癌細胞活性及IL8，COX2和VEGFC的影響姓名：張輝申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：王深明20090425穩(wěn)定轉染ERa基因對MDAMB23l乳腺癌細胞活性及IL8COX一2和VEGFC韻影響增殖、抑制凋亡、促進播散潛能、上調HER02表達、誘導芳香化酶合成等，從而促進惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展。有文獻報道COX一2的表達和腫瘤組織的ER狀態(tài)相關。在MDAMB23l等ER陰性

2、的乳腺癌細胞中COX2有較高表達，而在MCF7等ER陽性的乳腺癌細胞中未見其表達，這可能是ER陰性乳腺癌細胞惡性程度較高的原因之一。VEGFC是特異性的促淋巴管生成因子，可誘導淋巴管內皮細胞的增殖與淋巴管的生成，促進胚胎和腫瘤中淋巴管的新生與淋巴網絡形成。淋巴轉移是乳腺癌的主要轉移途徑之一，因此VGEFC對乳腺癌的侵襲和轉移具有重要的意義。VEGFC激活淋巴管內皮細胞上的VEGFR3，誘導磷脂酰肌醇3激酶信號通路使p42／p44絲裂原活

3、化蛋白激酶和蛋白激酶B信號通路激活，發(fā)生級聯反應，保護淋巴管內皮細胞免于血清來源誘導的凋亡，促淋巴管內皮細胞增殖和遷移，促淋巴管生成。病理學研究發(fā)現，VEGFC的表達也和ER狀態(tài)相關，在ER陰性的乳腺癌細胞中VEGFC呈高表達，并且其表達的量和腫瘤的大小，組織分級，核分級，血管侵襲以及淋巴結狀態(tài)高度相關。本研究選擇ER陰性細胞株MDAMB23l，擬通過轉染外源性的ER基因進入該乳腺癌細胞中，并建立穩(wěn)定表達ER的細胞株，觀察ER對ER陰性

4、乳腺癌細胞增殖和遷移能力的影響。另外，本研究選取三種與ER受體密切相關并影響乳腺癌細胞活性的三個生物學指標(IL8，COX2和VEGFC)進行測定，試圖初步闡述ER影響ER陰性乳腺癌細胞生物學特性的機制，為進一步深入研究打下基礎。方法1細胞培養(yǎng)乳腺癌細胞MDA—MB一231和MCF7均在含10％FBS的無酚紅DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：5％C02、37。C、95％濕度。兩種細胞進行功能實驗前48小時換用含lO‘8M17B雌二醇的無酚