麥冬提取物對藥物代謝酶CYP3A4誘導(dǎo)作用的研究.pdf

1、背景：中藥在我國以及韓國、日本等亞洲國家臨床上應(yīng)用相當廣泛。此外，植物藥及中草藥在西方國家也得到越來越廣泛的關(guān)注。長期以來，中藥制劑的給藥方案多憑經(jīng)驗，一般認為，中藥比化學(xué)藥物的不良反應(yīng)小，應(yīng)用更安全，但實際上中藥也能引起許多不良反應(yīng)，只是目前在這方面缺乏系統(tǒng)、科學(xué)的評估。中藥講究“君、臣、佐、使”，通常是由多種有效成分組成的混合物，與化學(xué)藥物相比，客觀評價其不良反應(yīng)包括中藥-西藥相互作用是一項巨大的挑戰(zhàn)。中藥的廣泛使用使得臨床上中藥與

2、中藥、中藥與化學(xué)藥合用的機會不斷增多，特別是老年人和慢性疾病患者往往多種藥物聯(lián)合應(yīng)用，不可避免地會發(fā)生藥物間的相互作用。因此，中藥與其他藥合用引發(fā)的相互作用和不良反應(yīng)已越來越多地引起國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。篩選中藥中的能介導(dǎo)藥物相互作用的成分已成為推動中藥合理安全應(yīng)用的一項非常重要的工作。此外，同一中藥的不同品系由于種植地區(qū)各種自然條件（氣候、土壤等）以及人工培育條件等方面的差異，往往其各種組分的含量及構(gòu)成比例也相應(yīng)地呈現(xiàn)出各種差異。所以，對

3、于同一中藥不同品系的相關(guān)研究和評價將更加深入地推動中藥配方的合理優(yōu)化與應(yīng)用。
　　目的：研究及比較中藥麥冬的兩個品種（川麥冬及浙麥冬）的提取物對細胞活性、PXR的激活以及藥物代謝酶CYP3A4的誘導(dǎo)等方面的影響以及差異。
　　方法：采用加熱回流法制備川麥冬和浙麥冬的醇提物和水提物;采用MTT法檢測川麥冬和浙麥冬醇提物和水提物對細胞活性的影響;采用Real-Time QPCR檢測比較人肝癌細胞系HepG2和人結(jié)直腸癌細胞系LS

4、-174T中PXR及CYP3A4的表達水平;采用本實驗室前期已構(gòu)建好的真核表達質(zhì)粒pcDNA3.1-hPXR、PGL3-P3A4、pRL-TK，瞬時轉(zhuǎn)染人肝癌細胞系HepG2細胞建立報告基因法以及基于LS-174T細胞模型的Real-Time QPCR檢測川麥冬和浙麥冬的醇提物和水提物對PXR的激活和對CYP3A4的誘導(dǎo)作用。
　　結(jié)果：浙麥冬和川麥冬的醇提物均有明顯的PXR的激活效應(yīng)且川麥冬的醇提物對PXR的激活能力相對更強（相

5、對于10μM利福平的誘導(dǎo)能力的百分比表示，浙麥冬醇提物vs川麥冬醇提物:0.1mg/ml，5.85±2.61％ vs24.38±7.20％(P=0.025);1mg/ml,27.49±4.53％ vs46.82±7.72％(P=0.021);5mg/ml,98.44±18.22％ vs139.58±1.86％(P=0.000));但是浙麥冬醇提物比川麥冬醇提物具有更強的CYP3A4的誘導(dǎo)效應(yīng)（相對于空白對照DMSO組的CYP3A4 mR

6、NA的誘導(dǎo)倍數(shù)表示，浙麥冬醇提物vs川麥冬醇提物:0.1mg/ml，1.17±0.42 vs1.02±0.49(P=0.814);1mg/ml,2.64±0.86 vs0.79±0.12(P=0.012);5mg/ml,6.94±1.79 vs2.70±0.69(P=0.000))。浙麥冬和川麥冬的水提物總體來說對PXR的激活能力要顯著低于相對應(yīng)的醇提物，但川麥冬水提物要具有相對更強的PXR誘導(dǎo)效應(yīng)（相對于10μM利福平的誘導(dǎo)能力的百分

7、比表示，浙麥冬水提物vs川麥冬水提物:0.1mg/ml,3.87±3.26％ vs3.79±2.20％(P=0.990);1mg/ml,6.09±2.59％ vs43.73±8.93％(P=0.000);5mg/ml,37.78±7.12％ vs74.16±13.15％(P=0.000));但二者對CYP3A4的誘導(dǎo)效應(yīng)沒有差別，均不能明顯誘導(dǎo)CYP3A4的表達（相對于空白對照DMSO組的CYP3A4 mRNA的誘導(dǎo)倍數(shù)表示，浙麥冬水提

8、物vs川麥冬水提物:0.1mg/ml,1.05±0.45 vs0.84±0.27(P=0.457);1mg/ml,0.86±0.19 vs1.10±0.21(P=0.403);5mg/ml，1.11±0.61 vs0.84±0.12(P=0.338))。此外，浙麥冬的醇提物具有明顯高于川麥冬醇提物的細胞毒性，而浙麥冬和川麥冬的水提物對細胞毒性影響不大并且二者僅有輕微的差別。
　　結(jié)論：浙麥冬潛在的毒副作用以及介導(dǎo)的CYP3A4依賴