透明質酸與人膀胱移行細胞癌生物學行為相關性的初步研究.pdf

1、研究目的： 1.探討人尿液中透明質酸濃度升高與膀胱移行細胞癌的關系，探索尿透明質酸含量檢測在膀胱移行細胞癌診斷中的可能意義； 2.研究人膀胱移行細胞癌組織中透明質酸的表達情況，求證患者尿液中透明質酸濃度升高的可能原因； 3.探索人膀胱移行細胞癌組織中透明質酸合成增加的可能原因，推測透明質酸與膀胱移行細胞癌生物學行為的關系； 4.研究人為阻斷膀胱移行細胞癌組織中透明質酸的大量合成的方法及其效果，為人膀胱移行

2、細胞癌的相應的基因治療奠定基礎。 研究方法： 1.分別應用放射免疫測定法和ELISA方法對不同級別的膀胱移行細胞癌患者、泌尿系非腫瘤性疾病患者和正常人尿液中的透明質酸進行檢測，并與患者的病理結果、臨床資料進行對比性研究； 2.應用免疫組織化學染色方法對不同級別的人膀胱移行細胞癌、正常膀胱黏膜組織切片中透明質酸的表達情況進行研究； 3.原代培養(yǎng)膀胱移行細胞癌組織中成纖維細胞，成功鑒定后穩(wěn)定傳代； 4

3、.應用半定量RT-PCR方法對人膀胱移行細胞癌組織、正常膀胱黏膜組織中成纖維細胞內透明質酸合成酶各亞型的表達情況進行研究，確定其優(yōu)勢表達亞型； 5.應用RNA干擾技術阻斷人膀胱移行細胞癌組織中成纖維細胞內透明質酸合成酶優(yōu)勢亞型的表達，了解該方法抑制細胞透明質酸合成的效果。 研究結果： 1.膀胱移行細胞癌患者尿液中透明質酸含量較正常人、其他泌尿系疾病患者明顯升高，且隨患者腫瘤病理分級、臨床分期的升高而升高；

4、 2.人膀胱移行細胞癌組織中透明質酸的表達較正常膀胱黏膜組織明顯顯著，腫瘤的級別越高，透明質酸表達似越明顯；大部分染色位于腫瘤細胞外基質； 3.成功進行了人膀胱移行細胞癌組織中成纖維細胞的原代培養(yǎng)和鑒定工作； 4.人膀胱移行細胞癌組織中成纖維細胞內有透明質酸合成酶1、3亞型的表達，尤以后者的表達為明顯，而人正常膀胱黏膜組織中成纖維細胞中僅有少量透明質酸合成酶1的表達； 5.RNA干擾技術使人膀胱移行細胞癌組織中成

5、纖維細胞內的透明質酸合成酶3的表達減少了78.2％，透明質酸的合成減少了60.3％。 研究結論： 1.患者尿液中透明質酸濃度升高與膀胱移行細胞癌的關系密切，透明質酸似可作為膀胱移行細胞癌的尿源性標記物之一； 2.人膀胱移行細胞癌組織中透明質酸大量出現(xiàn)，與腫瘤惡性程度似呈正相關；膀胱移行細胞癌患者尿液中透明質酸絕大部分來源于腫瘤組織； 3.人膀胱移行細胞癌組織中透明質酸很大一部分是由于腫瘤基質中成纖維細胞的