人參皂苷C-K抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用機(jī)制研究.pdf

1、腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的疾病之一，惡性腫瘤轉(zhuǎn)移更是導(dǎo)致腫瘤難以治愈和患者死亡的首要原因。腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素參與調(diào)控的極其復(fù)雜的過程，其中包括腫瘤細(xì)胞的浸潤、侵襲、轉(zhuǎn)移以及腫瘤新血管生成等。抑制惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移一直是腫瘤研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。人參皂苷C-K是原人參二醇型皂苷的主要代謝物之一，具有廣泛的藥理活性。人參皂苷C-K抗瘤效果明顯，但是有關(guān)抗腫瘤轉(zhuǎn)移的研究很少。本課題分別從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面，研究稀有人參皂苷C-K對(duì)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)

2、移的影響和作用機(jī)制。 本研究內(nèi)容包括，首先通過口服人參皂苷C-K來明確其是否對(duì)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移具有抑制作用；然后，分別采用粘附分析實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、人工基底膜體外重建實(shí)驗(yàn)、明膠酶譜分析及Western blotting等方法觀察人參皂苷C-K對(duì)人纖維肉瘤細(xì)胞HT1080體外侵襲過程中每一步驟和因素的影響；最后，應(yīng)用Matrigel管腔形成試驗(yàn)檢測人參皂苷C-K對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力和血管生成能力的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：①人參

3、皂苷C-K(20mg/kg體重，口服)能夠顯著抑制小鼠皮下H22肝癌和U14宮頸癌腫瘤的生長(p＜0.05)；同時(shí)，還能夠明顯減少由B16-F10黑色素瘤細(xì)胞引起的SPF C57BL/6小鼠肺表面轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量(p＜0.05)；顯著延長荷瘤小鼠的生存時(shí)間；②低劑量人參皂苷C-K(5mg/kg體重，口服)與環(huán)磷酰胺聯(lián)用即能表現(xiàn)出明顯的增效減毒作用(p＜0.01)；③人參皂苷C-K在體外能夠濃度依賴性地(2～160μM)抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖，

4、半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)一般在40μM左右；④在沒有明顯細(xì)胞毒活性的情況下(＜5μM)，人參皂苷C-K能夠濃度依賴性地顯著抑制腫瘤細(xì)胞與基底膜的粘附，減弱腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力和侵襲力，降低基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)的活性和表達(dá)量，上調(diào)金屬蛋白酶組織抑制劑2(TIMP-2)的表達(dá)；⑤當(dāng)用2μMC-K處理人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)，即可明顯抑制內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和管樣結(jié)構(gòu)形成；同時(shí)，人參皂苷C-K還能夠通過抑制腫瘤細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子(VE

5、GF)的分泌量影響血管生成。 結(jié)論：人參皂苷C-K能夠抑制B16-F10黑色素瘤細(xì)胞在小鼠體內(nèi)的肺轉(zhuǎn)移，延長荷瘤小鼠的生存時(shí)間，與化療藥物環(huán)磷酰胺聯(lián)用，具有一定的增效減毒作用。人參皂苷C-K抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制與其能夠降低腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)間粘附、抑制腫瘤細(xì)胞降解基底膜、減弱腫瘤細(xì)胞的遷移、干擾血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管生成緊密相關(guān)。 腫瘤的預(yù)防與治療始終是一大難題，人參皂苷C-K有望研究開發(fā)成為一種新型的抗腫瘤藥物，