人鼻息肉組織及外周血T淋巴細(xì)胞亞群分布的研究.pdf

1、目的：鼻息肉是一種常見病，發(fā)病率較高(成人1～4％)，復(fù)發(fā)傾向強(術(shù)后復(fù)發(fā)率15～40％)，在鼻科臨床中占有重要地位。因發(fā)病機制至今不清，給臨床治療帶來很大麻煩。既往發(fā)病病因上有很多學(xué)說，例如感染學(xué)說和變態(tài)反應(yīng)學(xué)說、植物神經(jīng)功能失調(diào)、代謝紊亂、血管運動功能失調(diào)、離子通透性改變、氣流動力學(xué)說、其中以感染和變態(tài)反應(yīng)最為重要，但每個學(xué)說都從某一側(cè)面解釋了鼻息肉的成因，未能從根本上闡明發(fā)病機理。近年隨著免疫學(xué)和分子生物學(xué)的快速發(fā)展，鼻息肉的發(fā)病

2、被認(rèn)為是多因素、多步驟的過程。變態(tài)反應(yīng)可能不是鼻息肉形成的原因，T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)則與鼻息肉形成關(guān)系密切。因此檢測鼻息肉組織中及外周血中T淋巴細(xì)胞亞群的分布，探討T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在鼻息肉中所起的作用，在理論上和實踐中均具有重要意義。 方法：70例鼻息肉標(biāo)本源自我科2003.10～2005.12住院手術(shù)的慢性鼻息肉患者，男38例，女32例；年齡25～69歲，平均47歲。其中Ⅱ型1期17例，Ⅱ型2期19例，Ⅱ型3期18例，

3、Ⅲ型16例。所有患者均經(jīng)鼻內(nèi)窺鏡、鼻竇CT檢查以及術(shù)后病理診斷證實。30例對照組標(biāo)本源自志愿者的下鼻甲粘膜。2組患者均無變應(yīng)性鼻炎、哮喘、阿司匹林特異反應(yīng)性、支氣管擴(kuò)張、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病等典型病史，近期(2周內(nèi))無急性呼吸道感染及類固醇藥物應(yīng)用史。2組患者均用皮內(nèi)試驗法進(jìn)行了吸入性變應(yīng)原檢測及血液中特異性IgE過篩檢測，均為陰性。所有標(biāo)本均于手術(shù)中取材，取下標(biāo)本迅速放入10％中性緩沖福爾馬林液中充分固定、石蠟包埋后備檢。應(yīng)

4、用熒光免疫流式細(xì)胞術(shù)檢測鼻息肉患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+的表達(dá)，并與正常人外周血的相應(yīng)指標(biāo)進(jìn)行比較. 試劑：鼠抗人CD4、CD8單抗購于北京邁新公司，單克隆抗體鼠抗人CD3FITC、CD4PE、CD8PE購于美國BD公司，SP試劑盒購于北京邁新公司。染色方法采用S-P法染色步驟進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。每例標(biāo)本均同時做HE染色。統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SAS統(tǒng)計軟件對實驗組和對照組各數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，方差齊做t檢驗，方差不齊做t'

5、檢驗，計算出p值(取p＜0.05為差異有顯著性)。 結(jié)果：陽性細(xì)胞計數(shù)：組織切片于光學(xué)顯微鏡下觀察。CD4+或CD8+細(xì)胞呈典型深棕色胞膜表達(dá)。在高倍顯微鏡(10X40)下，分別于上皮下和血管腺體周圍各選取10個視野，進(jìn)行陽性細(xì)胞計數(shù)，取平均值，為每高倍視野平均陽性細(xì)胞數(shù)。并計算出各組CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)。 1CD4+，CD8+細(xì)胞在鼻息肉組織中表達(dá)的情況： 鼻息肉組織中可見大量CD4+，CD8+細(xì)胞，分布特

6、點：其分布呈叢集性，多集中在上皮下和腺體血管周圍，而在間質(zhì)中則呈較均勻散在分布。CD4+細(xì)胞數(shù)明顯多于CD8+細(xì)胞數(shù)(圖3,4，5，6)。 1.1鼻息肉組織上皮下、腺體血管周圍CD4+細(xì)胞數(shù)(51.46±28.88、41.89±29.98)與對照組上皮下、腺體血管周圍CD4+細(xì)胞數(shù)(19.20±18.44、13.09±14.06)有顯著性差異(P＜0.01)(表1，2)。 1.2鼻息肉組織上皮下、腺體血管周圍CD8+細(xì)胞

7、數(shù)(26.32±19.43、21.04±16.76)與對照組上皮下、腺體血管周圍CD8+細(xì)胞數(shù)(16.30±15.73、12.83±12.36)有顯著性差異(P＜0.05)(表1，2)。 1.3鼻息肉組織上皮下、腺體血管周圍CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)比值(1.96±0.181.99±0.19)與對照組CD4+/CD8+比值(1.18±0.151.02±0.15)有顯著性差異(P＜0.01)(表1，2)。 1.4鼻息肉組織中

8、上皮下、血管腺體周圍CD4+細(xì)胞數(shù)分別為51.46±28.88、41.89±29.98，之間無顯著性差異(P＞0.05)(表4)。 1.5鼻息肉組織中上皮下、血管腺體周圍CD8+細(xì)胞數(shù)分別為26.32±19.43、26.32±19.43，之間無顯著性差異(P＞0.05)(表4)。 1.6鼻息肉組織中上皮下、血管腺體周圍CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)比值分別為1.96±0.18、1.99±0.19，之間無顯著性差異(P＞0.05

9、)(表4)。 2CD4+和CD8+細(xì)胞在對照組組織中表達(dá)的情況： 對照組中大部分切片可見CD4+和CD8+細(xì)胞，但數(shù)量很少，有的切片甚至未見CD4+和CD8+細(xì)胞，CD4+和CD8+細(xì)胞亦主要集中在腺體血管周圍，呈散在分布(圖7,8，9，10)。CD4+/CD8+比值為1.18±0.15。(表1，2)。 3CD4+，CD8+細(xì)胞在鼻息肉患者外周血中表達(dá)的情況： 鼻息肉患者外周血中可見大量CD4+，CD8+

10、細(xì)胞，分布特點：CD4+細(xì)胞明顯多于CD8+細(xì)胞(圖11，12)。 3.1CD4+細(xì)胞數(shù)為38.90±6.56與對照組CD4+細(xì)胞數(shù)25.08±4.74有顯著性差異(P＜0.01)。 3.2CD8+細(xì)胞數(shù)為29.36±4.96與對照組CD8+細(xì)胞數(shù)17.48±3.94有顯著性差異(P＜0.01)。 3.3CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)比值1.95±0.12與對照組CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)比值1.43±0.13有顯著性差

11、異(P＜0.01)(表3)。 4在對照組外周血中表達(dá)的情況： 對照組中CD4+，CD8+細(xì)胞數(shù)較少(圖13，14)，CD4+/CD8+細(xì)胞數(shù)比值1.43±0.13(表3)。 結(jié)論：本研究結(jié)果顯示CD4+，CD8+細(xì)胞在鼻息肉組織中和外周血中表達(dá)明顯增多，且CD4+明顯多于CD8+細(xì)胞。CD4+細(xì)胞數(shù)，CD8+細(xì)胞數(shù)及CD4+/CD8+與對照組均有顯著性差異，表明鼻息肉的發(fā)生與T淋巴細(xì)胞免疫失衡有關(guān)。T-輔助細(xì)胞是

12、免疫應(yīng)答中核心淋巴細(xì)胞，通過抗原遞呈細(xì)胞(antigenpresentingcell，APC)的加工處理，使T輔助細(xì)胞得以識別和活化，CD4+細(xì)胞增多，釋放多種相關(guān)細(xì)胞因子，細(xì)胞因子又通過相互間網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)的調(diào)控作用從而使各種炎細(xì)胞聚集、增殖和激活，發(fā)揮局部抗炎作用，但由于抗原作用的持久性，使局部炎癥反應(yīng)長期存在，呈慢性改變，在發(fā)揮抗炎作用的同時又造成了組織的損傷和演變，最終導(dǎo)致鼻息肉的形成。 深入研究T淋巴細(xì)胞與鼻息肉的相關(guān)性，探