自體骨髓間充質(zhì)干細胞移植修復兔膝關節(jié)軟骨缺損的實驗研究.pdf

1、背景與目的:該試驗研究的目的在于尋找一種較好的、來源廣泛并且豐富的種子細胞,用于軟骨組織工程修復關節(jié)軟骨的損傷.應用骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)作為種子細胞是軟骨組織工程修復關節(jié)軟骨損傷較理想的選擇.材料與方法:中國家兔15只,體重2.0~2.5kg,年齡不限,平均18月齡,雌雄不限.分別于雙側(cè)脛骨髁和雙側(cè)髂骨嵴抽取實驗動物骨髓5~6ml,分離出單個核細胞進行體外培養(yǎng)和擴增,得到骨髓MSCs

2、懸濁液;實驗組收集第2或第3代傳代細胞,進行細胞計數(shù),洗滌離心,在沉淀(即細胞)上加入由牛跟腱制備的Ⅰ型膠原凝膠液,混勻,使最終細胞密度為2×10<'6>個細胞/ml,將混合物在培養(yǎng)箱孵育10分鐘使骨髓間充質(zhì)干細胞-Ⅰ型膠原凝膠復合體膠化.細胞凝膠在2小時內(nèi)植入兔膝關節(jié)軟骨缺損內(nèi).同只實驗兔雙膝關節(jié)股骨臏面鉆孔,鉆孔直徑4.0mm,深度3~4mm,至髓腔出血,造成全層軟骨及軟骨下骨質(zhì)全部缺損.右側(cè)為實驗組,給予骨髓MSCs-膠原凝膠復合

3、體移植;左側(cè)為對照組,單純給予膠原凝膠移植.實驗動物術(shù)后放入鐵籠中自由活動.全部試驗動物于4、8、12周各取5例標本進行大體觀察和組織形態(tài)學觀察,并對修復軟骨組織的細胞形態(tài)、基質(zhì)染色、表面光滑度、軟骨厚度及與周圍組織整合情況進行評分.結(jié)論:1.骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)來源豐富、安全,是軟骨組織工程的理想種子細胞;2.骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)移植修復關節(jié)軟骨缺損效果明顯優(yōu)于照組單純膠原凝膠移植;3.三大因素促使移植骨髓間充質(zhì)干細胞