瘤胃厭氧真菌的篩選、誘變及發(fā)酵麩皮的研究.pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)產(chǎn)纖維素酶瘤胃厭氧真菌進(jìn)行了分離純化，篩選到一株高酶活的厭氧真菌WA1，并對(duì)該菌株的酶學(xué)性質(zhì)、誘變及對(duì)麩皮的發(fā)酵效果進(jìn)行了研究，結(jié)果如下：1.以篩選具有纖維素酶活性的瘤胃厭氧真菌為目的，采用的液體增菌、CMC-Na瓊脂厭氧培養(yǎng)的方法分離菌株，剛果紅染色，應(yīng)用透明圈直徑與菌落直徑比值法(H：C)確定其纖維素酶相對(duì)活力。結(jié)果分離得到一株纖維素酶相對(duì)活力高的瘤胃厭氧真菌，經(jīng)鑒定為Orpinlmyces屬菌(O型屬菌)。此菌株粗酶液的濾

2、紙酶活(FPase)，羧甲基纖維素酶活(CMCase)和水楊素酶活(salicinase)的最適反應(yīng)pH分別為5.0，5.5和5.0；其pH穩(wěn)定范圍分別為4.0～7.0、4.0～7.5、4.5～5.5；最適溫度分別是55℃、50℃和55℃。水楊素酶的熱穩(wěn)定性最好，CMCase次之，濾紙酶活由于是三類纖維素酶組分的綜合表現(xiàn)而呈現(xiàn)S型曲線。最適條件下，濾紙酶活高達(dá)117U/ml。 2.以誘變篩選高產(chǎn)纖維素酶瘤胃厭氧真菌為目的，采用透

3、明圈法對(duì)經(jīng)紫外線、亞硝基胍復(fù)合誘變的瘤胃厭氧真菌進(jìn)行初選，經(jīng)紫外線處理100s致死率為68％，經(jīng)亞硝基胍處理30min致死率為74％，以此作為適宜誘變時(shí)間，對(duì)瘤胃厭氧真菌孢子進(jìn)行紫外線加亞硝基胍復(fù)合誘變。涂皿培養(yǎng)后得到10株H：C值較大的菌株，傳代10次后測(cè)CMC酶活進(jìn)行復(fù)選。結(jié)果得到了7株高產(chǎn)纖維素酶瘤胃厭氧真菌，其中一株菌酶活OD值比出發(fā)菌株提高96％。 3.以研究瘤胃厭氧真菌在不同處理下對(duì)麩皮纖維素的發(fā)酵效果為目的，經(jīng)氨水