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文檔簡介
1、目的: 研究不同濃度的人類重組胰島素樣生長因子I(Rh IGF-I)對成骨細胞分泌骨形成蛋白-2(BMP-2)和血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)的影響。 方法: (l) 將人成骨細胞MG-63傳代培養(yǎng),取第二代細胞加入24孔板培養(yǎng)。 (2) 實驗組分別用含50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25ng/ml的RhIGF-I和2%BS的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),對照組用含2%BS的DMEM
2、溶液培養(yǎng)。 (3) 培養(yǎng)24h后將各濃度細胞收集.4%多聚甲醛固定,-20℃凍存?zhèn)溆谩?(4) 設(shè)置50 ng/ml RhIGF-I干擾組細胞4組. (5) 在培養(yǎng)的第0h,12h,24h,48h分別收集各組細胞爬片,4%多聚甲醛固定,-20℃凍存?zhèn)溆谩?(6) 經(jīng)免疫組化處理,用Breasalier法評價結(jié)果。 結(jié)果: (l) 經(jīng)Rh IGF-I處理的細胞VEGF表達增強,與對照組有顯著
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