次級淋巴趨化因子基因與腫瘤抗原修飾樹突狀細胞抗小鼠前列腺癌的實驗研究.pdf

1、目的: 從小鼠骨髓分離DC前體細胞，體外培養(yǎng)、擴增實驗所需的功能性DC。將RM-1前列腺癌細胞的裂解產物和SLC基因共轉染DC,構建前列腺癌DC瘤苗。研究該DC瘤苗的免疫生物學特性;觀察SLC＋Lysate-DC瘤苗對RM-1荷瘤小鼠的抗腫瘤免疫治療作用;探討SLC＋Lysate-DC瘤苗的抗腫瘤作用機制。 方法: 從小鼠骨髓分離前體細胞,在細胞因子GM-CSF和IL-4聯(lián)合作用下,經(jīng)過手法篩選,大量制備骨髓DC。通過脂質體轉

2、染法將SLC基因轉染DC,同時將RM-1前列腺癌細胞的裂解產物負載DC,制備SLC+Lysate-DC前列腺癌瘤苗;RT-PCR檢測轉染SLC的表達。建立小鼠前列腺癌模型, 將DC瘤苗瘤內注射至小鼠前列腺癌內，進行體內實驗，觀察其對荷瘤小鼠的免疫治療作用。免疫組化熒光染色檢測該DC瘤苗對CD4＋、CD8＋T細胞及CD11＋DC的趨化作用。 結果：在細胞因子GM-CSF和IL-4聯(lián)合作用下, 經(jīng)過7天的培養(yǎng)擴增,每只小鼠可得到約

3、5～10×106的DC。將SLC質粒通過脂質體轉染法轉染培養(yǎng)4天的DC,同時將RM-1前列腺癌細胞的裂解產物負載DC,構建SLC+Lysate-DC瘤苗,經(jīng)RT-PCR檢測證實轉染DC的SLCmRNA表達明顯增強。體內實驗顯示SLC＋Lysate-DC組能顯著抑制腫瘤的生長,能明顯延長荷瘤小鼠的存活時間,瘤體內有明顯的CD4＋、CD8＋T細胞和CD11＋DC浸潤。 結論: 小鼠骨髓前體細胞在細胞因子GM-CSF和IL-4聯(lián)合作