心臟手術(shù)病人體外循環(huán)前后血清的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、機體在經(jīng)歷體外循環(huán)過程后，由于包括補體、緩激肽等多種炎性介質(zhì)的激活，會出現(xiàn)一種類似“全身性的炎癥反應(yīng)”，并由此引起臟器功能的改變，對心、腦、肺、腎等生命重要器官都會產(chǎn)生不良影響，導(dǎo)致術(shù)后出現(xiàn)ARDS、腎功能不全、心律失常、低心排等嚴重并發(fā)癥。篩選出經(jīng)歷體外循環(huán)過程的心臟手術(shù)病人體外循環(huán)前后的血清中的差異表達蛋白質(zhì)，將為研究體外循環(huán)相關(guān)的病理狀態(tài)的病理生理學(xué)機制以及探討體外循環(huán)相關(guān)并發(fā)癥的預(yù)防和治療方面開拓新的思路。 本研究采用血

2、清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選并鑒定經(jīng)歷體外循環(huán)過程的心臟手術(shù)病人體外循環(huán)前后血清中的差異表達蛋白。采用雙向凝膠電泳技術(shù)（2-DE）分離心臟手術(shù)病人體外循環(huán)開始前30 min、體外循環(huán)結(jié)束后1h、體外循環(huán)結(jié)束后24h的血清蛋白質(zhì)，經(jīng)PDQuest圖像分析軟件識別差異蛋白質(zhì)點，切取蛋白質(zhì)斑點膠塊，酶解后再用基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）進行分析，數(shù)據(jù)庫查詢后對差異表達的蛋白質(zhì)點進行鑒定，然后應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（EL

3、ISA）檢測差異表達蛋白質(zhì)--血清淀粉樣蛋白A（Serum amyloid A protein，SAA）在健康人、心臟手術(shù)病人體外循環(huán)開始前30 min、體外循環(huán)結(jié)束后1h、體外循環(huán)結(jié)束后24h的血清中的表達情況，并進一步探討SAA的臨床應(yīng)用前景。 采用2-DE聯(lián)合質(zhì)譜技術(shù)最終成功鑒定了3種差異蛋白質(zhì)，即觸珠蛋白（HPT）、富亮氨酸α-2糖蛋白（A2GL）、血清淀粉樣蛋白A（SAA）。ELISA分析結(jié)果顯示：SAA在心臟手術(shù)病人

4、體外循環(huán)結(jié)束后1h血清中表達水平較體外循環(huán)開始前30 min升高了約3倍，SAA在心臟手術(shù)病人體外循環(huán)結(jié)束后24h的血清中表達水平較體外循環(huán)開始前30min升高了約19倍，而SAA在健康人和心臟手術(shù)病人體外循環(huán)開始前30 min的血清中表達水平無顯著差異。 本研究結(jié)果提示：HPT、A2GL、SAA可能與體外循環(huán)有關(guān)的溶血、組織損傷、炎癥等存在關(guān)聯(lián)；HPT可作為判斷心臟手術(shù)病人溶血嚴重程度的指標；SAA可作為經(jīng)歷體外循環(huán)過程的心臟