臍血間質(zhì)干細(xì)胞做載體轉(zhuǎn)基因TNF-α誘導(dǎo)裸鼠胃癌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、臍血間質(zhì)干細(xì)胞做載體轉(zhuǎn)基因TNFa誘導(dǎo)裸鼠胃癌細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究摘要[目的]：基于臍血問質(zhì)干細(xì)胞(MSC)作為腫瘤壞死因子Cl(TNFo)載體，研究TNFa在胃癌問質(zhì)近距離、持續(xù)、高濃度表達(dá)并觀察殺傷胃癌細(xì)胞的效果。[方法]：將培養(yǎng)好的人胃癌細(xì)胞SGC7901注射到15只裸鼠腹股溝皮下，建立人胃癌細(xì)胞SGC7901裸鼠移植瘤模型。將15只成瘤裸鼠隨機(jī)分為三組，分別為：臍血問質(zhì)干細(xì)胞做載體轉(zhuǎn)基因TNFQ組(MSCTNFa組)、臍血問質(zhì)干細(xì)

2、胞組(MSC組)、生理鹽水組(NaCl組)，每組5只，觀察14天。向三組裸鼠瘤周分別注射MSCTNFa、MSC及NaCI；MSCTNFo組和MSC組為治療組，NaCI組為對照組。注射前后定期觀察腫瘤生長情況，比較治療末三組裸鼠移植瘤體積大小有無差別。14天后處死裸鼠，取出腫瘤組織，測量腫瘤長徑、短徑，求得腫瘤的體積，計算抑瘤率，并繪制腫瘤生長曲線。熒光定量RTPCR分別測定MSCTNFa組、MSC組及NaCI組TNF—omRNA基因的表

3、達(dá)。Elisa法分別測定MSCTNFa組、MSC組及NaCl組TNFa蛋白的表達(dá)。對瘤組織病理切片和常規(guī)HE染色，觀察各組腫瘤內(nèi)壞死面積。[結(jié)果]：至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時MSCTNF0組、MSC組及NaCI組的移植瘤平均體積分別為(138021)enl3、(180023)cm3和(289_029)cm3，三組瘤體體積之間比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0001)，其中MSC—TNFo組與其它兩組比較均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0001)；MSC—TNFa組和M

4、SC組荷瘤小鼠的抑瘤率分別為5225％和3760％。RTPCR結(jié)果顯示MSCTNFQ組、MSC組及NaCI組均有TNFamRNA基因的表達(dá)，三組之間比較均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。Elisa結(jié)果顯示MSCTNFa組、MSC組及NaCl組均有TNF(21蛋白的表達(dá)，三組之間比較均有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。MSCTNFo組和MSC組瘤體壞死面積多于NaCI組，MSCTNFa組瘤體壞死面積多于MSC組，三組壞死面積評分之間比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0001)。

5、[結(jié)論]：MSCTNFa組、MSC組及NaCI組裸鼠胃癌組織中均有TNFa的表達(dá)。MSCTNFo對裸鼠胃癌細(xì)胞具有明顯的殺傷作用。TNFa和MSC能協(xié)同增加對裸鼠胃癌細(xì)胞的殺傷作用。碩士研究生張學(xué)彬(外科學(xué))指導(dǎo)教師毛偉征教授[關(guān)鍵詞]：間質(zhì)干細(xì)胞；轉(zhuǎn)基因；腫瘤壞死因子a；裸鼠；胃癌；凋亡ThetumournecrocytosisareasinMSC—TNFogroupandMSCgroupweremorethanNaCIgroupTh

6、etumournecrocytosisareasinMSCTNF—ogroupwasmorethanMSCgroupThedifferentsinthesegroupsaresignificant(P0001)Conclusion：TheexpressionoftheTNFowereallfoundedinMSCTNF—agroup，MSCgroupandNaCIgroupMSCTNF—acanobviouslykillgastricc

7、ancercellsinnudemiceTNFaandtheMSCcancooperatetoincreasethecytotoxicityofthenudemicegastriccancercellsPostgraduatestudent：XueBinZhang(Surgery)DirectedbyProfWeiZhengMaoKeyWords：MesenchymalStemCells；Transgenic；TumorNecrosis