替代性活化的巨噬細(xì)胞促進(jìn)小鼠肺腺癌淋巴管生成的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文替代性活化的巨噬細(xì)胞促進(jìn)小鼠肺腺癌淋巴管生成的實(shí)驗(yàn)研究姓名：章必成申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：陳正堂20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文LYvE一1，3H—TdR摻入法檢測(cè)LEC增殖活力，淋巴管形成實(shí)驗(yàn)判定LEC能否形成淋巴管樣結(jié)構(gòu)。5、采用transwell系統(tǒng)共培養(yǎng)aaMph珥口小鼠LEc，繪制LEC生長(zhǎng)曲線，細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)觀察LEC遷移，基質(zhì)膠實(shí)驗(yàn)觀察LEC管樣結(jié)構(gòu)形成；實(shí)時(shí)定量RT—PCR分

2、別檢測(cè)共培養(yǎng)前后aaMphi表達(dá)VEGF—c和VEGFDmRNA，以及LEC表達(dá)VEGFR一3和Prox1mRNA。之后，選擇濃度為100ng／ml的vEGFC建立aaMphi轉(zhuǎn)分化系統(tǒng)；分別于第0、7、14和28天以實(shí)時(shí)定量RT_PCR法檢測(cè)aaMphi表達(dá)VEGFR一3、Proxl和Fizzl；連續(xù)28天觀察管樣結(jié)構(gòu)形成情況。最后，采用transwell系統(tǒng)共培養(yǎng)aaMphi和小鼠LLC細(xì)胞，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)LLC細(xì)胞表達(dá)VEGF—

3、C，3H—TdR摻入法和transwell侵襲模型分別觀察aaMphi對(duì)LLC細(xì)胞增殖和侵襲的影響。結(jié)果l、人肺腺癌TAM計(jì)數(shù)(103361531)、vEGF—C陽(yáng)性指數(shù)(20601196)均明顯高于肺良性病變(3215548，382321)(PO05)，但前者VEGFR一3陽(yáng)性LMVD(11561073)明顯高于后者(429418)(PO05)。caMphi組和aaMphiCpGIL一10RA組移植瘤未見(jiàn)LYVE一1表達(dá)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，