補(bǔ)肺健脾方調(diào)控NF-κB-泛素-蛋白酶體信號(hào)通路改善COPD骨骼肌功能障礙作用機(jī)制.pdf

1、目的:評(píng)價(jià)補(bǔ)肺健脾方對(duì)慢性阻塞性肺疾?。–OPD）大鼠骨骼肌功能障礙的療效，并探討其調(diào)控 NF-κB-泛素（Ub）-蛋白酶體信號(hào)通路改善骨骼肌功能障礙作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
　　方法:SPF級(jí)SD大鼠72只隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、補(bǔ)肺健脾組、吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC為NF-κB的抑制劑）組、補(bǔ)肺健脾聯(lián)合PDTC組（以下簡(jiǎn)稱“聯(lián)合組”）和氨茶堿組，每組12只。采用香煙熏吸聯(lián)合細(xì)菌反復(fù)感染法制備COPD穩(wěn)定期大鼠模型。

2、自第9周起，對(duì)照組和模型組均給予生理鹽水灌胃，其余4組分別給予補(bǔ)肺健脾方、PDTC、補(bǔ)肺健脾方聯(lián)合PDTC及氨茶堿治療，給藥至第20周結(jié)束時(shí)取材。每月檢測(cè)大鼠肺功能潮氣量（VT）、呼氣峰流速（PEF）及50％潮氣量呼氣流速（EF50）；觀察大鼠肱二頭肌、股四頭肌、比目魚肌及肋間肌組織病理和超微結(jié)構(gòu)的變化；采用立體組織灌流系統(tǒng)檢測(cè)大鼠肱二頭肌、股四頭肌、比目魚肌及肋間肌張力；采用ELISA方法檢測(cè)大鼠股四頭肌組織中泛素（Ub）的含量；采用

3、熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測(cè)大鼠股四頭肌組織中腫瘤壞死因子（TNF）-αmRNA與核因子（NF）-κBmRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.一般情況:與對(duì)照組相比，模型組大鼠出現(xiàn)形體消瘦、精神差倦怠、活動(dòng)量減少、進(jìn)食進(jìn)水量減少等表現(xiàn)，補(bǔ)肺健脾組、PDTC組、聯(lián)合組及氨茶堿組上述變化均有改善，尤以補(bǔ)肺健脾組與聯(lián)合組的改善較為明顯。各組大鼠的體重隨周齡均呈遞增趨勢(shì)；模型組大鼠的體重增長(zhǎng)趨勢(shì)較對(duì)照組緩慢。補(bǔ)肺健脾組、聯(lián)合

4、組和氨茶堿組大鼠體重自13周起增長(zhǎng)趨勢(shì)較模型組快。但各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.肺功能:模型組大鼠肺功能VT自第8周起較對(duì)照組降低，其PEF及EF50自第4周起較對(duì)照組降低。聯(lián)合組大鼠肺功能VT、PEF及EF50自第16周起均高于模型組；補(bǔ)肺健脾組大鼠肺功能PEF自第16周起高于模型組（P<0.05）；聯(lián)合組大鼠肺功能EF50自第16周起高于PDTC。第20周時(shí)，補(bǔ)肺健脾組和聯(lián)合組大鼠肺功能VT、PEF、EF50均高于模型組。其

5、余各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3.骨骼肌組織病理和超微結(jié)構(gòu):模型組大鼠骨骼肌病理損傷較對(duì)照組嚴(yán)重，出現(xiàn)肌纖維萎縮斷裂、間隙增大、排列紊亂、肌細(xì)胞染色不均等病理改變；4個(gè)治療組較模型組均有改善，且補(bǔ)肺健脾組與聯(lián)合組的改善明顯優(yōu)于PDTC組與氨茶堿組。
　　模型組大鼠骨骼肌組織超微結(jié)構(gòu)的變化較對(duì)照明顯，肌纖維間線粒體明顯減少、線粒體嵴基本消失；4個(gè)治療組較模型組均有改善，且補(bǔ)肺健脾組與聯(lián)合組的改善明顯優(yōu)于PDTC組與氨茶堿組。

6、r>　　4.骨骼肌張力:模型組大鼠肱二頭肌、股四頭肌、比目魚肌、肋間肌張力較對(duì)照組均明顯下降；補(bǔ)肺健脾組、聯(lián)合組、PDTC組及氨茶堿組大鼠股四頭肌張力均高于模型組，補(bǔ)肺健脾組及聯(lián)合組大鼠肱二頭肌、比目魚肌、肋間肌張力均高于模型組；補(bǔ)肺健脾組和聯(lián)合組大鼠肱二頭肌、股四頭肌、肋間肌張力均高于氨茶堿組，聯(lián)合組大鼠比目魚肌、股四頭肌張力均高于 PDTC組與氨茶堿組；PDTC組與氨茶堿組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　5.股四頭肌組織NF-κB-泛

7、素-蛋白酶體信號(hào)通路相關(guān)指標(biāo)的表達(dá):模型組大鼠股四頭肌組織中Ub、TNF-αmRNA、NF-κBp65 mRNA的水平較對(duì)照組明顯升高；補(bǔ)肺健脾組與聯(lián)合組Ub、TNF-αmRNA、NF-κBp65 mRNA的水平均低于模型組，PDTC組與氨茶堿組U b的水平低于模型組，補(bǔ)肺健脾組、聯(lián)合組及PDTC組NF-κBp65 mRNA的水平均低于氨茶堿組；PDTC組與氨茶堿組 U b、TNF-α mRNA的水平均高于補(bǔ)肺健脾組與聯(lián)合組；PDTC組

8、與聯(lián)合組NF-κBp65 mRNA的水平均低于補(bǔ)肺健脾組；PDTC組與氨茶堿組U b、TNF-αmRNA的水平之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；PDTC組與聯(lián)合組NF-κBp65 mRNA的水平之間、模型組與氨茶堿組NF-κBp65 mRNA的水平之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論:
　　1．補(bǔ)肺健脾方可以明顯改善COPD模型大鼠骨骼肌功能障礙的一般狀況、肺功能、骨骼肌組織病理損害及骨骼肌張力，其作用明顯優(yōu)于PDTC與氨茶堿。
　　2．補(bǔ)