反義RNA技術(shù)下調(diào)多胺代謝關鍵酶抑制大腸癌細胞增殖及分子機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文通過成功構(gòu)建AdoMetDC-α亞基的原核表達載體pTriEx-AdoMetDC-α,在E.coliJM109(DE3)中誘導表達并純化了帶有His-Tag的融合蛋白,進一步以該重組蛋白為免疫原,制備抗人AdoMetDC抗體,并利用該抗體研究發(fā)現(xiàn),大腸癌組織中AdoMetDC的表達遠遠高于其癌旁正常組織,提示AdoMetDC基因表達可作為大腸癌病因、基因診斷及基因治療方法研究的靶分子。為進一步探討大腸癌基因治療方法,該文利用之前已構(gòu)

2、建的能同時表達ODC和AdoMetDC的重組腺病毒表達載體Ad-ODC-AdoMetDCas,體外證明其能通過抑制ODC和AdoMetDC的基因表達,使細胞周期阻滯于G1期,從而抑制大腸癌細胞的增殖。進一步分子機理研究證明Ad-ODC-AdoMetDCas可能是通過抑制cyclin D1啟動子活性,使cyclin D1基因表達下降,并使cyclin D1上游調(diào)節(jié)蛋白β-catenin核聚集下調(diào)而使細胞增殖停滯于G1期,為探討結(jié)直腸腫瘤的

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