內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子IRE1α、CRT在缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦皮質(zhì)中的表達(dá)及參附注射液的干預(yù)作用.pdf

1、目的：觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）相關(guān)因子肌醇需求蛋白1α(inositol requiring enzyme1alpha，IRE1α)、鈣網(wǎng)蛋白(calreticulin，CRT)在缺氧缺血性腦損傷新生大鼠腦皮質(zhì)中的表達(dá)變化及參附注射液對(duì)其表達(dá)的影響，探討參附注射液可能的腦保護(hù)機(jī)制。
　　方法：將新生7日齡Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(S)和HIB

2、D模型組，模型組又分為生理鹽水對(duì)照組(C)、參附治療組(SF)。各組按照觀測(cè)的時(shí)間點(diǎn)不同分為3h、6h、12h、24h、72h五個(gè)亞組，每個(gè)亞組10只。參照Rice法制備新生大鼠HIBD模型，在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)斷頭取右側(cè)皮質(zhì)腦組織，HE染色光鏡下觀察腦組織病理變化;逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)皮層腦組織中IRE1α mRNA及CRT mRNA的表達(dá)變化;Western-Blot法測(cè)定IRE1α及CRT蛋白的表達(dá)變化。
　　

3、結(jié)果：1.RT-PCR:生理鹽水對(duì)照組中IRE1αmRNA表達(dá)水平在3、6、12、24h時(shí)間點(diǎn)較假手術(shù)組升高(P＜0.05)，且在6h達(dá)到高峰;CRT mRNA表達(dá)水平在3h開(kāi)始增加，12h達(dá)到高峰，隨后逐漸下降，72h時(shí)與假手術(shù)組比較差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。參附治療組中IRE1α mRNA及CRTmRNA各時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量均較假手術(shù)組明顯升高(P＜0.05)，表達(dá)趨勢(shì)與生理鹽水對(duì)照組一致，但在6、12、24、72h時(shí)間點(diǎn)的表

4、達(dá)量較生理鹽水對(duì)照組升高明顯（P＜0.05）。2.Western-bolt;生理鹽水對(duì)照組和參附治療組中各時(shí)間點(diǎn)IRE1α蛋白表達(dá)量均較假手術(shù)組升高(P＜0.05)，表達(dá)高峰在缺氧缺血后12h;而CRT蛋白表達(dá)則從HI后6h開(kāi)始升高，24h達(dá)到高峰，72h有所下降，但仍高于假手術(shù)組（P＜0.05）。參附治療組IRE1α和CRT蛋白表達(dá)量在6、12、24、72h時(shí)間點(diǎn)較生理鹽水對(duì)照組升高明顯(P＜0.05)。
　　結(jié)論：1.新生大鼠