阿托伐他汀鈣對擴(kuò)張型心肌病心力衰竭患者促炎性細(xì)胞因子表達(dá)及NF-κB-p65活化的影響.pdf

1、目的：探討擴(kuò)張型心肌病(dilated cardiomyopathy，DCM)心力衰竭(heart failure，HF)患者外周血單個核細(xì)胞(peripheral bloodmononuclear cells，PBMCs)促炎性細(xì)胞因子(cytokines，CK)白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6) 、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的分泌和核因子-κB/p65(nuclear factor-κB/p65，NF-κ

2、B/p65)的活化，并比較二者的相關(guān)性；不同濃度的阿托伐他汀鈣(atorvastatin calcium，Ale)對脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的DCM HF 患者PBMCs CK表達(dá)和NF-κB/p65活化的影響及Ale抑制CK分泌的可能機(jī)制，為Ale應(yīng)用于DCM HF的治療提供理論依據(jù)。 方法：DCM組25例，來自瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科2005年7月至2005年12月的住院DCM HF患者

3、，心功能分級(NYHA分級法)Ⅱ～Ⅳ級，其中，Ⅱ級15例，Ⅲ級6例，Ⅳ級4例，左心室射血分?jǐn)?shù)平均<40％。對照組18例，來自同期瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診健康體檢者和同學(xué)們。抽取受試者空腹靜脈血5ml。應(yīng)用淋巴細(xì)胞分離液分離出單個核細(xì)胞，用含10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞數(shù)為2×107個/ml，分別吸取1ml細(xì)胞懸液于24孔培養(yǎng)板的4個孔內(nèi)，然后按實驗分組分別加入：A:1640培養(yǎng)基1ml；B:10-5mol/1

4、Ale培養(yǎng)基1ml；C:10-6mol/1Ale培養(yǎng)基1ml；D：10-7mol/1Ale培養(yǎng)基1ml。30分鐘后在4個孔內(nèi)各加入LPS(濃度為10μg/ml)0.5 ml。5％CO2飽和濕度的孵箱37℃孵育24h。離心后提取上清液并用放射免疫法測IL-1β、IL-6、TNF-α水平；細(xì)胞懸液涂片并固定后用生物素-鏈霉親和素免疫組織化學(xué)染色法測NF-kB/p65，在顯微鏡下計算其陽性細(xì)胞率。對指標(biāo)分別進(jìn)行t檢驗、單因素方差分析和Pear

5、son相關(guān)分析。 結(jié)果： 1．DCM組IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-kB/p65的水平均顯著高于對照組(P＜0.01)，分別為IL-1β(8.24±0.70ng/L vs 3.89±1.25 ng/L)、IL-6(2372.43±277.12 pg/L vs 382.05±142.22 pg/L)、TNF-α(3.03±0.22 ng/L vs 1.29±0.25 ng/L)和NF-kB/p65(32.63％±

6、5.80％ vs 10.58％±1.91％)。 2．隨著Ale濃度的增加，DCM組和對照組IL-1β、IL-6、TNF-α水平和NF-kB/p65陽性細(xì)胞率呈進(jìn)行性下降(p＜0.05)；10-7mol/1Ale組、10-6mol/1Ale組、10-5mol/1Ale組IL-1β、IL-6、TNF-α水平和NF-kB/p65陽性細(xì)胞率均顯著低于0 mol/1Ale組(p＜0.05)；10-5mol/1組IL-1β、TNF-α水平和

7、NF-kB/p65陽性細(xì)胞率均顯著低于10-6mol/1組、10-7mol/l組(p＜0.05)；10-6mol/l組IL-6水平顯著低于10-7 mol/1組(p＜0.05)；但106mol/1組IL-1β、TNF-α水平、NF-kB/p65陽性細(xì)胞率和10-7mol/1組相比，10-5mol/1組IL-6水平和10-6mol/1組相比則無顯著性差異(p＞0.05)．且DCM組IL-1β、IL-6、TNF-α水平和NF-kB/p65陽

8、性細(xì)胞率下降程度顯著高于對照組(P＜0.05)。 3．對照組和DCM組NF—kB/p65陽性細(xì)胞率與IL-1β、IL-6、TNF-α水平均呈顯著正相關(guān)，對照組(r值分別為0.647、0.575、0.536，P值分別小于0.01、0.05、0.05)；DCM組(r值分別為0.527、0.657、0.515，P值分別小于0.05、0.01、0.05)。 結(jié)論： 1.DCM CHF患者外周血CK分泌和NF-kB/p65