雷公藤內酯醇體內外抗腫瘤作用及對腫瘤組織中凋亡相關基因表達的影響.pdf

1、雷公藤內酯醇(triptolide TPL)由衛(wèi)矛科植物雷公藤根(去皮)提取、純化得到的結晶單體化合物，是雷公藤主要活性成分之一，具有抗腫瘤、抗炎、免疫抑制和抗生育等多種藥理作用。近些年雷公藤內酯醇抗腫瘤作用廣受關注，然其抗腫瘤機制尚不明確，且鑒于其安全范圍較窄，體內研究報道較少，故本課題對其體內外抗腫瘤作用及機制作進一步研究，為進一步研究其毒性特點及最終臨床應用提供劑量參考及理論依據(jù)。 目的:研究雷公藤內酯醇的體內外抗腫瘤作用

2、及其作用機制。 方法:應用四甲基偶氮唑藍(MTT)法觀察雷公藤內酯醇對MCF-7、HL-60、MGC-803、HepG-2、U266、Ca-46、Hela等腫瘤細胞的增殖抑制作用，并計算其IC<,50>;不同濃度(25、50、100μg/L)的雷公藤內酯醇處理HL-60細胞24h后，AnnexinV-FITC/PI熒光染色法檢測調亡率，分光光度法檢測caspase-3酶活化程度；應用S180、H22、U14、B16小鼠移植腫瘤模

3、型進行體內實驗，設立高中低劑量組(0.35、0.175、0.0875 mg/kg)，尾靜脈注射，隔天一次，連續(xù)5次，觀察雷公藤內酯醇對小鼠移植瘤的抑制作用；應用人胃癌細胞株MGC-803裸鼠移植瘤模型進行體內實驗，設立高中低劑量組(0.4、0.2、0.1 mg/kg)，尾靜脈注射，隔天一次，連續(xù)10次，觀察雷公藤內酯醇對人胃癌細胞株MGC-803裸鼠移植瘤的抑制作用；采用免疫組化技術(PV-9000兩步法)檢測雷公藤內酯醇在產(chǎn)生抑瘤作用

4、的同時對MGC-803腫瘤組織中凋亡相關基因Bcl-2、Bax及survivin表達的影響。 結果:雷公藤內酯醇對MCF-7、HL-60、MGC-803、HepG-2、U266、Ca-46、Hela等人腫瘤細胞均有很強的增殖抑制作用，其IC<,50>分別為34.37、5.51、31.95、6.31、9.74、26.96、9.75μg/L；不同濃度(25、50、100μg/L)的雷公藤內酯醇可誘導HL-60細胞凋亡，其凋亡率分別為

5、65.96％、58.22％、78.8％，在誘導凋亡的同時，caspase-3酶活化程度明顯升高，分別是對照組的1.65、2.14、2.36倍；雷公藤內酯醇對S180、H22、U14、B16等小鼠移植瘤均有明顯抑制作用，0.35mg/kg劑量組的抑制率分別為61.0％、49.4％、41.8％、58.0％；雷公藤內酯醇對人胃癌細胞株MGC-803裸鼠移植瘤具有明顯抑制作用，0.4 mg/kg劑量組的抑制率為64.6％；免疫組化結果表明與對照