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文檔簡介
1、目的: 本實驗在應(yīng)用導師經(jīng)驗方治療前列腺癌取得較好臨床效果基礎(chǔ)上,通過體內(nèi)、體外實驗,探討方中有效抗癌成分雷公藤內(nèi)酯醇對小鼠前列腺癌細胞株RM-1和小鼠前列腺癌模型的增殖抑制作用及其可能機制,以期為臨床提供安全有效的抗前列腺癌藥物。 方法: 體外實驗采用小鼠前列腺癌RM-1傳代細胞,用MTT 實驗檢測TL對RM-1細胞的增殖抑制作用;用吖啶橙熒光染色檢測TL對RM-1凋亡細胞形態(tài)學影響;用流式細胞術(shù)分析TL對RM
2、-1細胞周期及凋亡峰的作用;用梯狀電泳方法檢測TL對RM-1細胞DNA的凋亡作用;用RT-PCR法檢測TL對RM-1細胞 caspase-3、bcl-2 mRNA表達水平的影響。體內(nèi)實驗采用C57BL/6小鼠皮下注射RM-1細胞,建立前列腺癌動物模型,檢測腫瘤體積和重量計算腫瘤生長抑制率;TUNEL技術(shù)檢測前列腺癌組織中凋亡細胞;免疫組化檢測方法觀察藥物對實驗動物腫瘤組織 caspase-3基因及其蛋白bcl-2表達水平的影響。
3、 結(jié)論: 1.TL抑制小鼠前列腺癌細胞株RM-1增殖,并呈一定的時間和劑量依賴性。 2.TL抑制小鼠體內(nèi)前列腺癌細胞生長。 3.TL誘導RM-1細胞凋亡。 4.TL誘導小鼠體內(nèi)前列腺癌細胞凋亡。 5.TL抑制腫瘤增長作用是通過誘導細胞凋亡實現(xiàn)的。 6.TL提高RM-1細胞caspase-3并降低bcl-2mRNA表達。 7.TL提高小鼠體內(nèi)前列腺癌細胞caspase-3并降低bcl
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