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1、高遷移率蛋白I(high mobility group protein I,HMGI或HMGA1a)屬于非組蛋白的染色質(zhì)結(jié)合蛋白,是迄今發(fā)現(xiàn)的最主要轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)因子(architectural transcription factor)之一,廣泛參與基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié),并且涉及染色質(zhì)調(diào)整(chromatin remodeling),與細胞增殖、分化、凋亡和腫瘤轉(zhuǎn)化等過程的調(diào)控關(guān)系密切.同時它也是一種磷酸化修飾蛋白,但目前有關(guān)蛋白激酶C(PKC)
2、對其調(diào)節(jié)的研究不多.血小板源生長因子-B鏈(platelet-derived growth factor-B chain,PDGF-B)基因的誘導(dǎo)表達涉及動脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生、發(fā)展過程.目前對PDGF-B基因表達調(diào)節(jié)的詳細機制也尚未完全了解.本研究觀察體外PKC對HMGI的磷酸化作用,闡明其作用位點;著重觀察HMGI與PDGF-B基因上游調(diào)控序列的結(jié)合及對該基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)作用,并且通過對磷酸化位點的定點突變,觀察PKC磷酸化對HMG
3、I調(diào)節(jié)PDGF-B基因轉(zhuǎn)錄的影響.本研究結(jié)果顯示:(1)重組人HMGI可被PKC磷酸化,主要的磷酸化位點是Ser44和Ser64;(2)HMGI可與PDGF-B基因上游序列結(jié)合,結(jié)合序列主要是TTTATAAA,可能位于-1333/-1326bp,-1314/-1307bp和-30/-23bp等處;(3)PKC磷酸化減低HMGI與PDGF-B基因上游序列的結(jié)合;(4)HMGI促進PDGF-B基因轉(zhuǎn)錄,可能通過促進NF-κ B與PDGF-B
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