XRCC1基因單核苷酸多態(tài)，環(huán)境暴露因素與非吸煙女性肺癌關(guān)系的研究.pdf

1、肺癌是我國大中城市中惡性腫瘤的第一位死因，其發(fā)病率和死亡率增長迅速。盡管吸煙是肺癌發(fā)生的首要原因，但其不足以解釋非吸煙肺癌患者的流行病學(xué)特征。特別是女性肺癌患者多以非吸煙者為主，肺腺癌為主要病理類型。肺癌的形成是一個(gè)多因素、多階段的過程，是環(huán)境危險(xiǎn)因素和個(gè)體遺傳因素復(fù)雜交互作用的結(jié)果。DNA修復(fù)基因單核苷酸多態(tài)可以改變機(jī)體蛋白質(zhì)功能以及個(gè)體修復(fù)損傷DNA的能力，而DNA修復(fù)能力的缺陷會(huì)導(dǎo)致個(gè)體遺傳的不穩(wěn)定性乃至癌癥的發(fā)生。X射線修復(fù)交叉

2、互補(bǔ)基因(X-ray repair cross complementing groupl．XRCC1)是一個(gè)重要的DNA損傷修復(fù)基因，它在堿基切除修復(fù)和單鏈斷裂修復(fù)機(jī)制中都發(fā)揮了關(guān)鍵性的作用。XRCC1基因單核苷酸多態(tài)很可能改變其編碼蛋白的功能和修復(fù)能力，從而導(dǎo)致遺傳的不穩(wěn)定性和癌癥的發(fā)生。 目的： 本研究旨在應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)—限制性片段長度多態(tài)性(PCR—RFLP)技術(shù)檢測并分析了非吸煙女性人群中XRCC1 Arg19

3、4Trp，Arg280His，Arg399Gln和XRCC1 T-77C多態(tài)性改變及其單體型與非吸煙女性肺癌易感性關(guān)系以及與環(huán)境暴露危險(xiǎn)因素的交互作用，為篩檢高危人群，進(jìn)行肺癌一級(jí)預(yù)防提供理論依據(jù)。 方法： 本研究采用病例對(duì)照研究方法，包括新發(fā)非吸煙女性肺癌350例，取癌旁組織提取基因組DNA。非癌對(duì)照350例，按年齡(±5歲)與病例頻數(shù)匹配，采外周血提取基因組DNA，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RF

4、LP)技術(shù)，檢測并分析了XRCC1四種多態(tài)性(XRCCl Argl94Trp，Arg280His，Arg399Gln和XRCC1 T-77C)基因型改變；同時(shí)通過流行病學(xué)調(diào)查分析非吸煙女性肺癌可能的環(huán)境暴露危險(xiǎn)因素；采用非條件logistic回歸分析多態(tài)基因型與肺癌的相關(guān)關(guān)系及其與暴露環(huán)境危險(xiǎn)因素的交互作用；應(yīng)用SHEsis軟件推測多態(tài)位點(diǎn)的單體型并分析其與非吸煙女性肺癌易感性的關(guān)系。 一、單因素分析 1、環(huán)境危險(xiǎn)因素及

5、XRCC1突變等位基因在病例組和對(duì)照組中的分布 無論在工作場所或家庭中，成年期或未成年期均未見到被動(dòng)吸煙與非吸煙女性肺癌發(fā)生有何聯(lián)系。病例組與對(duì)照組間煤煙暴露史，腫瘤家族史也無顯著性差異。但病例組患者油煙暴露的比例顯著高于對(duì)照組(42.3％vs 22.0％，p<0.05)。油煙暴露引起肺癌的相對(duì)危險(xiǎn)度OR為2.60(95％CI[1.87-3.61])。此外，在350名正常對(duì)照中，XRCC基因各位點(diǎn)的突變等位基因的頻率分別為：XR

6、CC1-77C=0.09；194Trp=0.25；280His=0.11；399Gin=0.25，頻率分布符合Hanay-Weinberg遺傳平衡定律。但XRCC1 T-77C和Arg399Gha等位基因的頻率在病例組和對(duì)照組中的分布存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異(P=0.004和0.003)。 2、XRCC1基因各位點(diǎn)多態(tài)基因型與非吸煙女性肺癌易感性的關(guān)系 XRCC1基因Arg194TrP和Arg280His兩個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性與

7、肺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)無顯著性關(guān)聯(lián)。在調(diào)整了年齡和油煙暴露等因素后，攜帶XRCC1 399Gin/Gin基因型的個(gè)體患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)是攜帶純合野生基因型個(gè)體的1.73倍(95％CI[1.01～2.97]，P=0.01)。攜帶XRCC1-77TC的個(gè)體與攜帶-77TT者比較，患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)增加了51％(校正OR=1.51，95％CI[1.01～2.97]，P=0.04)，而攜帶-77CC的個(gè)體與-77TT者比較，其患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)增加約2倍(校正OR=3.

8、14，95％CI[0.96～10.30]，p=0.091)，但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性水平。 3、分層分析 將肺癌組按病理組織類型進(jìn)行分層分析，發(fā)現(xiàn)腺癌組XRCC1密碼子399位點(diǎn)和啟動(dòng)子區(qū)域-77位點(diǎn)多態(tài)基因型分布與對(duì)照組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而且攜帶XRCC1399Gln和-77C突變等位基因的個(gè)體發(fā)生肺腺癌的危險(xiǎn)性更大。攜帶雜合突變型A瑪/Gin和純合突變型Gin/Gin基因型的個(gè)體患肺腺癌的風(fēng)險(xiǎn)分別是A

9、rg/Arg基因型攜帶者的1.61倍(95％CI為1.09～2.36，)和2.58倍(95％CI為1.42～4.69)。攜帶-77TC/CC聯(lián)合突變基因型的個(gè)體患肺腺癌的風(fēng)險(xiǎn)增加到1.81(校正OR=1.81，95CI[1.18～2.79])。在鱗癌組和其他類型組中，XRCC1基因四個(gè)多態(tài)位點(diǎn)基因型在病例組與對(duì)照組間的分布均無顯著性差異。 二、多因素logistic回歸分析 我們首先剔出了在單因素分析中無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義

10、的變量因素，最后進(jìn)入到回歸方程的變量包括XRCC1基因兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)(399密碼子和啟動(dòng)子區(qū)域-77)和兩個(gè)非遺傳因素(年齡和烹飪油煙暴露)。烹飪油煙暴露是回歸模型中最重要的危險(xiǎn)因素(癌癥組：校正OR=2.51；腺癌組：校正OR=2.75)；在此模型中，遺傳因素對(duì)非吸煙女性肺癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)具有相對(duì)中等的影響。399位點(diǎn)Gln/Gln基因型攜帶者(Gln/Gln vs Arg/Arg：OR=1.75，95％CI[1.02～3.01])和啟動(dòng)子

11、區(qū)域-77C突變等位基因(TC+CC vs TT：OR=1.66，95％CI[1.13～2.42])攜帶者均可顯著增加患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)。按肺癌病理組織類型分層分析顯示，肺腺癌組的OR值比總肺癌組略有增加，而且399位點(diǎn)Arg/Gln基因型攜帶者發(fā)生肺腺癌的風(fēng)險(xiǎn)也顯著增加(校正OR=1.63，95％CI[1.11～2.40。P=0.014])。 三、XRCC1單體型與非吸煙女性肺癌易感性關(guān)系 通過SHEsis軟件進(jìn)行單體型分析

12、表明，本研究中的四種位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)存在著顯著的連鎖不平衡，D’最小為0.72(所有的P＜0.0001)。根據(jù)已知的4個(gè)位點(diǎn)基因型可推斷出12種單體型，我們將等位基因頻率小于0.03的單體型合并，有六種單體型在對(duì)照組中占93.9％，在病例組中占86％。對(duì)病例組和對(duì)照組單體型分布的總體檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)存在顯著性差異(P＜0.0001)。與正常T-Arg-Arg-Arg單體型比較，T-Arg-His-Arg和T-Trp-Arg-Arg單體型可降低

13、患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=0.67和0.75)；而T-Trg-Arg-Gin單體型可顯著提高患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)(OR=2.26)。 四、烹飪油煙暴露與XRCC1多態(tài)基因型交互作用對(duì)非吸煙女性肺癌的影響 我們進(jìn)一步利用非條件logistic回歸模型分析XRCC1 Arg399Gln或XRCC1T-77C與烹飪油煙暴露對(duì)非吸煙女性肺癌患病風(fēng)險(xiǎn)的交互作用。將雜合和純合突變基因型進(jìn)行聯(lián)合分析，在有油煙暴露史的非吸煙女性中