鏡鯉不同選育世代對皰疹病毒(CyHV-3)抗病力評估.pdf

1、錦鯉皰疹病毒病(KHVD)由錦鯉皰疹病毒3型(CyHV-3)引起，隨著該病在全球鯉養(yǎng)殖產(chǎn)區(qū)的連續(xù)爆發(fā)，給鯉的規(guī)模化養(yǎng)殖帶來巨大經(jīng)濟損失，因此研究鯉對CyHV-3防御機制對防治該病具有重要意義。對鏡鯉抗錦鯉皰疹病毒(CyHV-3)新品種的選育工作，目前已進行到F3代。本研究利用實時熒光定量PCR技術及免疫指標檢測試劑盒技術研究三個選育世代的CyHV-3病毒載量、免疫相關基因(TRAF6、MyD88a、IL-1β、TLR7a、I-IFN)的

2、表達、磷酸酶活性(AKP、ACP)、抗氧化能力(GSH、SOD、T-AOC)、特異性免疫相關指標(IgM)及非特異免疫相關指標(LZM、C3、C4)的變化規(guī)律，對鏡鯉抗病選育世代進行抗病力評估。研究結果如下：
　　CyHV-3病毒載量比較：病毒感染時，三個選育世代的脾中CyHV-3病毒載量均顯著高于腎，說明CyHV-3可能主要侵染鯉的脾組織。三個選育世代間， CyHV-3病毒載量在脾和腎中呈下降趨勢，其中F3脾、腎中病毒載量顯著低

3、于F1、F2，推測選育世代間抗病力具有逐代增強的趨勢，且F3抗病力顯著。
　　免疫基因表達分析：(1)未感染組中TRAF6、TLR7a、MyD88a及IL-1β基因的表達量呈現(xiàn)上升趨勢，I-IFN基因的表達量在三個選育世代間呈下降趨勢，僅TRAF6基因在F3的表達量顯著高于F1、F2，推測在選育世代間，除TRAF6基因表達較高外，其他基因未受選育影響。(2)感染組中I-IFN、TLR7a、TRAF6、MyD88a、IL-1β基因在

4、三個選育世代中的表達水平均呈上升趨勢，F(xiàn)3脾中MyD88a、IL-1β基因顯著高于F1、F2、TRAF6基因顯著高于F1，F(xiàn)3腎中IL-1β、TRAF6基因顯著高于F1、F2，推測選育世代間抗病力具有逐代增強的趨勢，F(xiàn)3抗病力顯著。免疫基因表達水平在脾、腎間存在顯著性差異。其中，脾中TLR7、I-IFN基因表達量顯著高于腎，腎中TRAF6、MyD88及IL-1β基因表達量顯著高于脾。結合病毒載量的結果說明病毒感染時，腎可能是免疫CyHV

5、-3的主要免疫器官，且TRAF6、MyD88及IL-1β基因在抗病毒感染中起到重要作用。
　　組織中免疫指標變化：三個選育世代中AKP活性呈上升趨勢，ACP活性變化趨勢與AKP相反，推測可能是由于ACP和AKP最適pH值不同造成的。F2、F3的AKP活性顯著高于F1，說明AKP活性水平呈逐代增強趨勢。腎中AKP顯著高于脾，脾中ACP活性顯著高于腎，說明磷酸酶活性存在一定組織間差異性。脾、腎中SOD無顯著差異，脾中T-AOC顯著高于

6、腎，腎中GSH指標僅在F2中顯著高于脾，其余均無顯著性差異。三個選育世代中SOD、T-AOC、GSH指標均存在F1　　血清中免疫指標變化：血清中非特異性免疫指標LZM、C3、C4和特異性免疫指標IgM在三個選育世代間均呈上升趨勢，其中F3的IgM、LZM水平均顯著高于F1

7、，F(xiàn)3的LZM、補體C4水平均顯著高于F2，F(xiàn)2的補體C4水平低于F1但無顯著性差異，以上結果推測選育世代間抗病力具有逐代增強的趨勢，且F3抗病力顯著。
　　養(yǎng)殖對比實驗結果：選育世代F1、F2、F3抗病成活率分別為61.1％、86.6%、92.5%，對照組抗病成活率為57.4%，說明選育世代間抗病力逐代提高，F(xiàn)3抗病效果顯著。
　　總之，本研究從CyHV-3病毒載量、免疫基因表達及免疫相關指標三個方面評估選育世代抗病力結果