德宏州和重慶市HIV-1新近感染及耐藥性研究.pdf

1、目的：對用于HIV-1新近感染檢測的BED-CEIA方法的實驗性能進行評價；應用BED-CEIA方法在德宏州和重慶市的HIV-1感染者中進行檢測，估算高危人群的HIV-1發(fā)病率；對德宏州和重慶市檢出的新近感染者進行基因型耐藥檢測和亞型的分析，研究上述兩地區(qū)新近感染者中HIV-1的分子流行病學情況及耐藥的流行情況：探討根據(jù)Trugene耐藥報告中沉默突變個數(shù)初步區(qū)分樣品亞型的可能性。 研究方法： 1、對在國家艾滋病參比實驗

2、室和重慶、德宏兩個HIV確證實驗室使用BED-CEIA方法進行新近感染檢測的59、35和18塊酶標板中質(zhì)控品(NC、CAL、LPC和HPC)的OD和OD-n進行統(tǒng)計分析。對三個實驗室初篩和確證實驗結(jié)果的一致性進行比較，得出R<'2>值。使用同一血清盤，將11位不同實驗人員的實驗結(jié)果與參比室實驗員的實驗結(jié)果進行比較，得出R<'2>值。 2、對德宏、重慶、新疆和廣東庫存的1400份已知感染時間1年以上的HIV-1長期感染樣品進行BE

3、D-CEIA檢測，探討該方法的假陽性率及其影響因素。 3、對德宏州2005年和2006年所有新診斷的HIV-1陽性樣品進行BED-CEIA檢測，估算不同人群的HIV-1發(fā)病率。 4、對重慶2006年MSM中檢出的103份HIV-1陽性樣品進行BED-CEIA檢測并估算發(fā)病率。 5、使用Bayer Trugene HIV-1方法對德宏州和重慶市檢出的部分新近感染樣品進行基因型耐藥檢測，同時使用Trugene、HIV

4、db和Geno2pheno三種方法進行耐藥性判定。 6、使用系統(tǒng)進化樹、HIVseq和Geno2pheno三種方法進行亞型分析，并對三種方法的結(jié)果進行比較。 7、對樣品的亞型與Trugene耐藥報告中沉默突變的個數(shù)之間的關(guān)系進行探討。 8、根據(jù)不同人群HIV-1感染率的不同，使用BED-CEIA發(fā)病率公式或者McDougal發(fā)病率計算校正公式估算HIV-1發(fā)病率。 9、實驗數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0進行統(tǒng)

5、計分析。 結(jié)果： 1、三個實驗室的OD和OD-n的CV值都比較低，OD-n的CV值均在12％以內(nèi)：三個實驗室的初篩和確認實驗結(jié)果的一致性高，其R<'2>均大于0.90；實驗結(jié)果在12名不同操作者之間的可重復性強，R<'2>=0.9777。 2、通過使用BED-CEIA檢測1400份感染時間1年以上的長期感染樣品，得到適合中國的發(fā)病率計算校正系數(shù)，即采用γ=0.9348(ε=0.0652)計算HIV-1發(fā)病率。

6、 3、BED-CEIA檢測接受ART的HIV-1長期感染樣品和CD4≤50個/μl的未接受ART的HIV-1長期感染者樣品時，錯分率較高；在HIV-1長期感染者中，錯分率與年齡、性別以及接受ART的時間無關(guān)，但在接受ART的感染者中，漢族高于少數(shù)民族(P<0.05)。 4、BED-CEIA估算的重慶市MSM的HIV-1發(fā)病率為7.27(95％CI，4.79-9.75)。 5、在德宏州2005年和2006年，BED-C

7、EIA估算的IDU的HIV-1發(fā)病率分別為6.01(95％CI，3.78-8.23)和，8.74(95％CI，5.71-11.77)(P>0.05)；暗娼為0：69(95~CI，0-2.04)和1.39(95％CI，0-3.31)(P>0.05)；孕產(chǎn)婦為0.17(95％CI，0.08-0.27)和0.12(95％CI，0.06-0.19)(P>0.05)。2006年婚檢人群的發(fā)病率為0.13(95％CI，0.02-0.24)。

8、 6、德宏州(N=64)和重慶市(N=22)HIV-1新近感染者中的耐藥流行率分別為6.25％和4.55％。三種耐藥判定方法Trugene、HIVdb和Gen02pheno的結(jié)果存在差異。 7、重慶MSM新近感染者中以CRF07_BC為主，占77.27％(17/22);德宏州HIV-1新近感染者中的亞型有CRF07_BC/CRF08_BC、C、B和CRF01_AE，C/RF07_BC/CRF08_BC占65.63％(42164)

9、。與HIVseq相比，Gen02pheno的分型正確率較高。 8、HIV-1新近感染者中CRF07_BC、CRFOS_BC、C以及CRF01_AE等非B亞型(N=75)樣品的沉默突變的個數(shù)明顯要比B亞型(N=13)多，分別為63.8(95％CI，37.7-89.9)和31.2(95％CI，7.2-55.1)。 結(jié)論： 1、BED-CEIA方法具有較高的檢測性能，穩(wěn)定性和重復性均比較高。 2、得到適合中國的

10、BED-CEIA發(fā)病率計算公式校正系數(shù)。 3、應用BED-CEIA方法時，應盡可能排除接受ART的HIV-1長期感染樣品和CD4+T淋巴細胞計數(shù)≤50個/μl的樣品。 4、重慶市MSM的感染率和發(fā)病率均處在較高的水平，需繼續(xù)加大監(jiān)測力度和干預力度。 5、德宏州IDU人群的HIV-1感染率和發(fā)病率保持在一個較高的水平上，應繼續(xù)監(jiān)測該地區(qū)高危人群的發(fā)病率變化趨勢。 6、我國HIV-1新近感染人群的耐藥流行率仍