hNIS基因轉(zhuǎn)導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞介導(dǎo)放射性碘攝取的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、鈉/碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體(NIS)是一種真正調(diào)節(jié)甲狀腺及其他組織碘轉(zhuǎn)運(yùn)活性的膜蛋白.NIS在甲狀腺的病理生理中發(fā)揮著關(guān)鍵性作用,它實現(xiàn)了甲狀腺組織攝取碘并運(yùn)行甲狀腺素的生物合成,實現(xiàn)了甲狀腺功能亢進(jìn)和分化型甲狀腺癌的顯像診斷和放射性碘治療.近年來,對NIS的進(jìn)一步分子學(xué)研究表明,NIS有可能對甲狀腺及非甲狀腺腫瘤的診斷和放射性碘治療產(chǎn)生更加深遠(yuǎn)的影響.目的:獲取人鈉/碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體(hNIS)基因cDNA,研究其轉(zhuǎn)導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞在體外和體內(nèi)能否介

2、導(dǎo)放射性碘攝取,從而探索該策略用于黑色素瘤放射性碘治療的可能性.方法:運(yùn)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法從人甲狀腺組織總RNA中擴(kuò)增出hNIS基因cDNA序列,將其克隆至pUCm-T載體并亞克隆至真核載體pcDNA3中,電轉(zhuǎn)化法分別將含hNIS基因的重組質(zhì)粒pcDNA3-hNIS及空質(zhì)粒pcDNA3轉(zhuǎn)導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞(B16),分別建立了細(xì)胞系B16-A和B16-B.在體外培養(yǎng)條件下檢測其對放射性碘的攝取及碘外流的情況,繼而將三

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