分月扇舟蛾顆粒體病毒病理、毒力及蛋白基因的研究.pdf

1、本文以分月扇舟蛾顆粒體病毒為研究對象，通過電鏡觀察、室內(nèi)生物測定、石蠟切片等方法，系統(tǒng)研究了該病毒的超微結構、病毒毒力以及野外防治的效果；最后通過提取病毒的DNA，從基因組中擴增出顆粒體蛋白基因，對其核苷酸序列與蛋白質(zhì)序列進行分析，預測蛋白質(zhì)二級結構，為研究該基因在病毒感染中的作用提供依據(jù)。 本研究取得以下研究成果： (1)在分月扇舟蛾顆粒體病毒超微結構的試驗中，通過掃描電鏡和透射電鏡觀察到，病毒顆粒體形態(tài)呈橢圓形或卵圓

2、形，有的呈現(xiàn)不規(guī)則形，形態(tài)平均大小為428.54×237.96nm；在透射電鏡下顯示病毒桿、內(nèi)膜與囊膜構成病毒粒子，病毒粒子平均大小為223.44×58.51nm。 (2)分月扇舟蛾顆粒體病毒的室內(nèi)生物測定試驗結果表明，濃度對數(shù)和死亡幾率值的回歸直線方程為y=1.946+0.558x，LC50為2.97×105PIB·mL-1。1.58×105PIB·mL-1，1.58×106PIB·mL-1、1.58×107PIB·mL-1、

3、1.58×108PIB·mL-1、1.58×109PIB·mL-1w的半致死時間(LT50)分別為8.55d，6.89d，5.9d，4.65d，4.08d，隨著濃度的增大，LT50逐漸縮短。 (3)通過對取食病毒不同時間的幼蟲制作石蠟切片，在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，顆粒體病毒可在中腸細胞中形成，細胞核變大，使中腸細胞嚴重變形，但不侵染馬氏管和圍食膜。 (4)在顆粒體蛋白基因的研究中，利用PCR技術擴增得到498bp片段，測序后

4、將所得序列與CacGV、PsGVA25-6、CpGVA11-2、AoGVS45、CmGVA11-1、HcGVA5-1的相應區(qū)段進行序列比較，其中與楊扇舟蛾顆粒體病毒(CacGV)蛋白基因的相似性最高；對該基因的蛋白質(zhì)基本性質(zhì)進行了分析，結果顯示存在一個明顯的疏水區(qū)，沒有顯著意義的跨膜區(qū)，同一氨基酸在使用不同的密碼子上存在一定的偏向性；蛋白質(zhì)的二級結構分析表明該基因分別由α螺旋(38.55％)、β折疊(18.07％)、β轉(zhuǎn)角(10.24％