ALK1在系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及功能研究.pdf

1、目的：探討激活素受體樣激酶1(ALK1)在系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及其在纖維連接蛋白和Ⅰ型纖溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)產(chǎn)生中的作用。
　　 方法：Westernblot和免疫熒光法觀察比較ALK1在正常人和系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)，并設(shè)計針對ALK1的特異性小干擾RNA(siRNA)，利用轉(zhuǎn)染試劑將ALK1siRNA瞬時轉(zhuǎn)染至原代培養(yǎng)的系統(tǒng)性硬皮病患者和正常人皮膚成纖維細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞分兩

2、組，一組用OPTI-MEM(Gibco)培養(yǎng)，另一組在OPTI-MEM中加入TGFβ1。培養(yǎng)72h后，Westernblot檢測纖維連接蛋白和PAI-1蛋白量的變化。
　　 結(jié)果：Westernblot和免疫熒光法結(jié)果顯示ALK1在正常人和系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞中均有表達(dá)，且在系統(tǒng)性硬皮病患者中的表達(dá)量明顯高于正常人，免疫熒光結(jié)果顯示在成纖維細(xì)胞中ALK1位于胞膜和胞漿中。轉(zhuǎn)染了ALK1siRNA的成纖維細(xì)胞其ALK1、