2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的: 放射性碘治療甲狀腺癌是臨床常用方法。非甲狀腺來源腫瘤通過轉(zhuǎn)染hNIS基因也能攝取碘,端粒酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)和神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)啟動(dòng)子都是腫瘤特異性啟動(dòng)子,對于靶向性治療膠質(zhì)瘤有潛在的研究價(jià)值。
   方法: 先擴(kuò)增GFAP、hTERT啟動(dòng)子等基因,并保存于相應(yīng)質(zhì)粒中

2、。并測定各啟動(dòng)子的啟動(dòng)效率,然后構(gòu)建了hTERT啟動(dòng)子引導(dǎo)腺病毒早起蛋白(early region1A,E1A)基因同時(shí)GFAP啟動(dòng)子引導(dǎo)鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體(human sodium iodidesymporter,hNIS)基因的條件復(fù)制腺病毒。膠質(zhì)瘤細(xì)胞被腺病毒轉(zhuǎn)染后,利用病毒空斑形成實(shí)驗(yàn)檢測條件復(fù)制腺病毒的復(fù)制能力。進(jìn)行Western blots實(shí)驗(yàn),125I內(nèi)流及外流實(shí)驗(yàn)并進(jìn)行131I細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn),來評(píng)估細(xì)胞攝碘情況。最后,在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的

3、基礎(chǔ)上,構(gòu)建膠質(zhì)瘤荷瘤裸鼠模型,進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)放射性碘治療實(shí)驗(yàn)。
   結(jié)果: 成功擴(kuò)增了相應(yīng)基因并保存。實(shí)驗(yàn)證明GFAP啟動(dòng)子啟動(dòng)效率能達(dá)到SV40啟動(dòng)子的60%左右,hTERT啟動(dòng)子啟動(dòng)效率能達(dá)到SV40啟動(dòng)子的43%左右。成功構(gòu)建了條件復(fù)制腺病毒Ad-Tp-E1A-Gp-NIS,并感染膠質(zhì)瘤細(xì)胞。Westernblot實(shí)驗(yàn)顯示43、70、49、120、70、110kDa的條帶,分別對應(yīng)著β-acting、GFAP、hTERT

4、、hNIS和hTPO蛋白。病毒復(fù)制實(shí)驗(yàn)證明了Ad-Tp-E1A-Gp-NIS的有效性,hTERT啟動(dòng)子能成功的限制腺病毒在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制。攝125I實(shí)驗(yàn)證明GFAP啟動(dòng)子能成功引導(dǎo)hNIS基因表達(dá)并攝取碘。細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)中顯示感染Ad-Tp-E1A-Gp-NIS后腫瘤細(xì)胞能成功的被131I殺死。成功構(gòu)建了U87荷瘤裸鼠模型了,感染Ad-Tp-E1A-Gp-NIS并進(jìn)行放射性碘治療后裸鼠生存周期延長,腫瘤生長被抑制,核素顯像顯示荷瘤裸鼠腫

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