屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥的臨床、病理、超微結(jié)構(gòu)和致病基因定位的研究.pdf

1、屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥(Reticularpigmentedanomalyoftheflexures，RPAF,OMIMnumber：179850)又稱Dowling-Degos病(Dowling-Degosdisease，DDD)，是一種是一種少見的常染色體顯性遺傳性皮膚病。臨床特征是對(duì)稱性的褐色斑疹，漸擴(kuò)展融合成網(wǎng)狀，好發(fā)在腹股溝、股內(nèi)側(cè)、腋下、腕、頸等屈側(cè)部位，多于青春期發(fā)病。屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著至今報(bào)道的文獻(xiàn)不多，至今大約50篇屈側(cè)網(wǎng)狀

2、色素沉著文獻(xiàn)，多為個(gè)案報(bào)道。 目的： (1)研究屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥的臨床表現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)該病臨床表現(xiàn)新特點(diǎn)。 (2)研究屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥的病理、超微結(jié)構(gòu)的變化。 (3)在染色體上定位屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥致病基因。 方法： (1)對(duì)一個(gè)屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥大家系進(jìn)行實(shí)地調(diào)查，記錄每位患者的發(fā)病年齡、性別、皮損的部位和特點(diǎn)，在獲得患者同意的情況下拍照并抽血，分析它們的臨床和遺傳特點(diǎn)。 (2)對(duì)

3、家系中4名患者的皮損活檢，進(jìn)行病理、免疫組化和電鏡觀察。 (3)用覆蓋全基因組22條常染色體的382個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)該家系進(jìn)行全基因組掃描，用MegaBACE-1000DNA分析系統(tǒng)進(jìn)行微衛(wèi)星標(biāo)記的分型，linkage軟件對(duì)基因分型結(jié)果進(jìn)行兩點(diǎn)參數(shù)連鎖分析，用Cyrillic軟件進(jìn)行單倍型構(gòu)建，確定定位區(qū)域的上下界。 結(jié)果： (1)該RPAF家系四代，至少包括成員62人(部分家系成員拒絕參與調(diào)查研究)，其中21名患

4、者。我們?cè)诮o體檢的14名患者中，所有患者均有屈側(cè)色素沉著的典型臨床表現(xiàn)，還有一些不典型的臨床表現(xiàn)，例如我們首次發(fā)現(xiàn)一名患者的皮損為單側(cè)色素沉著(早期表現(xiàn))、肢端網(wǎng)狀色素沉著癥樣表現(xiàn)、遺傳性對(duì)稱性色素異常癥樣表現(xiàn)、泛發(fā)性色素異常癥樣表現(xiàn)。 (2)組織病理顯示表皮角化過度，毛囊角栓多見，表皮突向下延長(zhǎng)呈狹窄的枝條狀，粒層增厚，棘層輕度肥厚，棘層中部細(xì)胞可見空泡變性，基底層黑素增多，尤以向下延伸的表皮突為甚；真皮淺層可見角囊腫和散在黑

5、素顆粒和噬黑素細(xì)胞，小血管周圍輕度單一核細(xì)胞浸潤(rùn)。電鏡下觀察到黑素細(xì)胞活躍，可見大量的黑素小體分布于基底層角質(zhì)形成細(xì)胞質(zhì)內(nèi)胞。 (3)用Linkage軟件進(jìn)行兩點(diǎn)連鎖分析。在第1到第16條常染色體和第18到第22條常染色體上沒有發(fā)現(xiàn)與RPAF明顯連鎖的證據(jù)(沒有連鎖值大于3的標(biāo)記)。因此，排除該病與這21條常染色體連鎖的可能性，首先出現(xiàn)連鎖值(LOD值)值大于3的標(biāo)記是17號(hào)染色體上的D17S831(最大LOD值Zmax=3.6

6、1，重組率θ=0.00)，因此，初步確定了RPAF與17號(hào)染色體連鎖。 為了進(jìn)一步證實(shí)和精細(xì)定位RPAF，我們從GénéthonHumanLinkageMap數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)挑選了覆蓋D17S938遠(yuǎn)端區(qū)域的其他標(biāo)記進(jìn)行進(jìn)一步的基因分型和連鎖分析，結(jié)果顯示其中LOD值大于3的有D17S1866(Zmax=3.61，θ=0.00)和D17S1529(Zmax＝3.01，重組率θ=0.00)，充分說明RPAF與17號(hào)染色體連鎖。我們通過單倍

7、型分析進(jìn)一步縮小易感區(qū)域范圍，單倍型分析結(jié)果顯示家系中帶有致病基因的染色體在標(biāo)記D17S1828和D17S1810之間、標(biāo)記D17S1810和D17S938之間、標(biāo)記D17S831和D17S1798之間發(fā)生重組，說明D17S1798近端不是RPAF的易感區(qū)域、D17S1798的遠(yuǎn)端6.8cM為RPAF的易感區(qū)域。 結(jié)論： (1)屈側(cè)網(wǎng)狀色素沉著癥的臨床表現(xiàn)復(fù)雜，具有多樣臨床色素變化譜。該病具有典型的屈側(cè)色素沉著臨床表現(xiàn)的

8、同時(shí)，還有一些不典型的臨床表現(xiàn)。我們首次發(fā)現(xiàn)一名患者的皮損為單側(cè)色素沉著(早期表現(xiàn))，首次發(fā)現(xiàn)一名患者同時(shí)具有肢端網(wǎng)狀色素沉著癥樣表現(xiàn)、遺傳性對(duì)稱性色素異常癥樣表現(xiàn)和泛發(fā)性色素異常癥樣表現(xiàn)。 (2)組織病理特征性顯示表皮突向下延長(zhǎng)呈狹窄的枝條狀。電鏡下觀察到黑素細(xì)胞活躍，可見大量的黑素小體分布于基底層角質(zhì)形成細(xì)胞。 (3)我們首次RPAF致病基因定位在17號(hào)常染色體短臂17p13.3上D17S1798遠(yuǎn)端的區(qū)域內(nèi)。該區(qū)域