人膽囊癌裸鼠原位模型的建立、單克隆細(xì)胞株的分離及雙自殺基因體內(nèi)外殺傷作用的研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文人膽囊癌裸鼠原位模型的建立、單克隆細(xì)胞株的分離及雙自殺基因體內(nèi)外殺傷作用的研究姓名：常新忠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師：王占民20040406山東人掌博，J學(xué)位論艾人膽囊癌裸鼠原位模型的建立、單克隆細(xì)胞株的分離及雙自殺基因體內(nèi)外殺傷作用的研究研究生常新忠導(dǎo)師王占民教授中文摘要第一部分：人膽囊癌裸鼠原位移植瘤模型的建立目的利用組織塊法建立技術(shù)較為成熟的人膽囊癌裸鼠原位移植瘤模型，了解其生長(zhǎng)特點(diǎn)、鏡下形

2、態(tài)、超微結(jié)構(gòu)、染色體分析及腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)等生物學(xué)特性，同時(shí)利用免疫組化法檢測(cè)瘤組織中一些與侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白表達(dá)。材料和方法人膽囊癌細(xì)胞GBC—SD培養(yǎng)于加入10％新生牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中，胰酶消化后將約2106(O2m1)個(gè)GBCSD細(xì)胞注射于裸鼠皮下成瘤，取所成腫瘤組織剪成小塊接種于裸鼠皮下，建立組織塊法皮下移植瘤模型：同時(shí)將瘤組織塊接種于膽囊，膽囊原位成瘤后取出瘤組織，同法接種于下一只裸鼠的膽囊，如此反復(fù)傳代，建立

3、原位移植瘤模型；裸鼠衰竭時(shí)處死尸解，觀察腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移情況，并取瘤組織做常規(guī)病理切片顯微鏡下觀察，做超薄切片透射電鏡觀察。sP免疫組化法檢測(cè)與轉(zhuǎn)移及侵襲相關(guān)的蛋白表達(dá)，實(shí)體瘤直接法行染色體分析，取原位瘤、皮下瘤模型及『F常對(duì)照裸鼠的血清，酶聯(lián)免疫法檢測(cè)相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物。結(jié)果人膽囊癌裸鼠組織塊法皮下移植瘤模型的成瘤率為22％，原位移植瘤模聚總的成瘤率為83％，其中第代成瘤率57％，第二代成瘤率67％，第三代成瘤率83％，第四代、第五代及第