雙自殺基因CDTK載體的構(gòu)建及其對人視網(wǎng)膜母細胞瘤株Y79的殺傷作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、視網(wǎng)膜母細胞瘤(retinoblastoma，RB)是嬰幼兒最常見的眼內(nèi)惡性腫瘤，該病嚴重威脅患者的視力和生命。傳統(tǒng)的治療方法或存在應用的局限性，或存在遠期毒副作用。隨著腫瘤分子生物學的發(fā)展，基因治療作為一種新的治療策略，已越來越受到人們的重視。其中，自殺基因治療惡性腫瘤是國內(nèi)外研究的熱點。本實驗嘗試構(gòu)建腫瘤特異性雙自殺基因載體pc-DNA3.1-CMV-hTERT-CDTK(pc-ChCDTK)，在此基礎(chǔ)上研究其對人視網(wǎng)膜母細胞瘤Y7

2、9細胞在體內(nèi)外的殺傷作用。 目的：構(gòu)建腫瘤特異性雙自殺基因載體pc-ChCDTK。 方法：利用PCR擴增CMV增強子、hTERT啟動子、yCD及TKgly 4種元件，并構(gòu)建過渡載體T-CMV、T-hTERT、T-yCD、T-TKgly，連至pc-DNA3.1(-)質(zhì)粒載體上構(gòu)建成雙自殺基因載體pc-DNA3.1-CMV-hTERT-CDTK(pc-ChCDTK)；對各個元件、過渡載體及最終載體進行瓊脂糖凝膠電泳、酶切和測

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