茶樹(shù)菇深層發(fā)酵及其多糖功能的研究.pdf

1、論文對(duì)茶樹(shù)菇深層發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的優(yōu)化，胞內(nèi)胞外多糖的提取、初步純化，成分分析及其免疫功能等方面進(jìn)行了研究。 采用搖瓶發(fā)酵法研究了不同碳源，氮源對(duì)茶樹(shù)菇菌絲體干重及胞外多糖產(chǎn)量的影響，結(jié)果表明，茶樹(shù)菇深層發(fā)酵最適的碳源為玉米粉，最適的氮源為酵母粉，并通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化了深層發(fā)酵培養(yǎng)基。結(jié)果表明，最優(yōu)的培養(yǎng)基組成為玉米粉2％、酵母粉0.3％、KH2PO40.2％、MgSO40.05％。通過(guò)單因素試驗(yàn)表明，茶樹(shù)菇搖瓶發(fā)酵的適宜培養(yǎng)

2、條件為培養(yǎng)溫度25℃，裝液量60mL/250mL三角瓶，搖瓶轉(zhuǎn)速150r/min，接種量15％，起始pH自然，培養(yǎng)5d。 對(duì)茶樹(shù)菇胞內(nèi)和胞外多糖的提取工藝進(jìn)行了研究，通過(guò)單因素法確定了胞內(nèi)多糖水提法的最適條件：提取溫度80℃-90℃，水料體積比4：1，提取10h，共提取3次，醇析中加入3倍體積95％的乙醇。應(yīng)用響應(yīng)面分析法對(duì)胞外多糖醇析過(guò)程進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，在添加4倍體積95％乙醇，醇析17小時(shí)，PH5.5的條件下，胞外多糖

3、產(chǎn)量可達(dá)5.76mg/mL。 一般營(yíng)養(yǎng)成分分析結(jié)果表明。茶樹(shù)菇發(fā)酵菌絲體和子實(shí)體均含有較高的蛋白質(zhì)，碳水化合物，兩者的含量比較接近；全氨基酸分析結(jié)果表明，茶樹(shù)菇發(fā)酵菌絲體、發(fā)酵液和子實(shí)體均含有17種氨基酸。茶樹(shù)菇通過(guò)深層發(fā)酵獲得的菌絲體所含有的氨基酸與子實(shí)體所含有的氨基酸在組成和比例上比較相似。微量元素分析結(jié)果顯示，茶樹(shù)菇菌絲體和子實(shí)體中均含有較高的Ca、Fe、Zn等人體易缺少的微量元素。單糖組成分析結(jié)果表明，不同來(lái)源的茶樹(shù)菇深

4、層發(fā)酵多糖在單糖組成上基本相似，都是以葡萄糖作為其主要成分，其次是半乳糖。 采用Sevage法去除游離蛋白質(zhì)，H2O2脫色、蒸餾水透析去除無(wú)機(jī)鹽等方法對(duì)茶樹(shù)菇菌絲體多糖和發(fā)酵液多糖進(jìn)行初步純化，經(jīng)真空干燥后獲得白色粉末。急性毒性試驗(yàn)表明，在大劑量腹腔注射菌絲體多糖和發(fā)酵液多糖的情況下，未出現(xiàn)小鼠死亡，也未有明顯毒性反應(yīng)。說(shuō)明茶樹(shù)菇多糖無(wú)毒性或毒性很小，其最大安全劑量在200mg/kg以上。探討了不同來(lái)源的茶樹(shù)菇多糖對(duì)小鼠免疫功能