鼻咽癌候選轉移相關基因caveolin-1的初步研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩61頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma)是我國南方省份及東南亞高發(fā)的一種惡性腫瘤,具有明顯的種族聚集性和地域性?,F在的研究認為鼻咽癌是在多種因素協同作用下,經過多步驟、多階段發(fā)生發(fā)展形成的,其發(fā)生可能與EBV病毒、理化環(huán)境因素、遺傳因素等有關。鼻咽癌具有頸淋巴結轉移早、遠處轉移發(fā)生率高等特點,但是目前對鼻咽癌侵襲和轉移的分子機制尚不十分清楚。 Cavcolin-1(Cav-1,窖蛋白或小窩蛋白)是胞膜窖cave

2、olae的主要結構蛋白,由細胞膜內陷形成,與小泡運輸,膽固醇穩(wěn)定和細胞信號轉導的調控相關。Cav-1在終末分化的細胞或者靜止的細胞中高表達,包括脂肪細胞、內皮細胞、平滑肌細胞等。以往的研究表明,Cav-1基因作為候選抑瘤基因在細胞的增殖中起負性調控的作用。然而,很多研究小組證實,Cav-1在腫瘤轉移中高表達并能促進腫瘤的發(fā)展。 采用pSIJPER.retro干擾載體系統(tǒng),構建了針對caveolin-1(Cav-1)的RNA干擾載

3、體(shCav-1)。經測序結果證實后,利用脂質體轉染技術將shCav-1導入具有成瘤、高轉移特性的5-8F鼻咽癌細胞株,經嘌呤霉素篩選獲得抗性克??;RT-PCR結果表明,shCav-1表達載體特異性的引起Cav-1的表達下調,Western Blot分析表明轉染了shCav-1的5-8F細胞中Cav-1的蛋白表達下調了95﹪以上,就此,我們已成功地建立穩(wěn)定轉染shCav-1的5-8F細胞株(5-8F-shCav-1)。 隨后,

4、我們進一步考察了Cav-1的表達被干擾后對5-8F細胞的生物學特性的影響。流式細胞分析結果表明,轉染shCav-1后5-8F細胞明顯發(fā)生G0/G1期阻滯現象。 平板克隆形成實驗和MTT比色法觀察5-8F-Cav-1細胞的增殖能力,以轉染pSIUPER.retro空白載體的5-8F細胞(5-8F-pSUPER.retro)作為對照,觀察5-8F-shCav-1細胞的增殖情況,結果表明5-8F-shCav-1細胞的增殖速度明顯低于對

5、照組。提示Cav-1被干擾后導致5-8F細胞的克隆形成能力和增殖能力降低。 利用Matrigel侵襲模型和劃痕實驗證實,Cav-1被干擾后5-8F細胞的侵襲能力和運動能力減弱。裸鼠腹腔內接種后成瘤及轉移能力的比較分析結果進一步提示,Cav-1被干擾后5-8F細胞的成瘤和轉移能力均下降。 本實驗利用RNA干擾技術,建立了穩(wěn)定表達shCav-1的干擾細胞株,成功地沉默了Cav-1基因在5-8F細胞中的表達;Cav-1基因被干

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論