GDNF-PROKR1和Proks-PROKRs信號通路在無神經(jīng)節(jié)細胞癥中的表達及意義.pdf

1、目的:
　　檢測GDNF/PROKR1和Proks/PROKRs信號通路相關蛋白在無神經(jīng)節(jié)細胞癥狹窄段、擴張段組織中的表達，并探討其與無神經(jīng)節(jié)細胞癥發(fā)生關系，揭示其在腸壁神經(jīng)節(jié)細胞發(fā)生發(fā)展中的重要意義，為無神經(jīng)節(jié)細胞癥的診斷和治療提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　選取2010年1月至2012年3月在天津市兒童醫(yī)院診治的無神經(jīng)節(jié)細胞癥患兒手術切除組織標本30例，應用HE和免疫組化技術分別檢測Prok1、Prok2、GDNF

2、、PROKR1、PROKR2、MAPK、AKT在無神經(jīng)節(jié)細胞癥狹窄段和擴張段中的表達情況;應用計算機成像系統(tǒng)留取照片，并用圖像分析軟件(Image-Pro-Plus)分別判斷Prok1、Prok2、GDNF、PROKR1、PROKR2、MAPK和AKT在無神經(jīng)節(jié)細胞癥狹窄段與擴張段的腸神經(jīng)節(jié)細胞和神經(jīng)叢中的表達情況，所有蛋白的表達量均用平均光密度值來表示和計算。
　　結果:
　　1.Prok1、Prok2在無神經(jīng)節(jié)細胞癥腸壁

3、狹窄段的肌間及黏膜下神經(jīng)叢中均呈陰性表達;Prok1在擴張段神經(jīng)叢中呈陰性表達，Prok2在擴張段神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細胞中呈陽性表達。
　　2.PROKR1在無神經(jīng)節(jié)細胞癥腸壁擴張段的肌間及黏膜下神經(jīng)叢的神經(jīng)節(jié)細胞中呈強陽性表達，而在無神經(jīng)節(jié)細胞癥狹窄段大多表達呈陰性(92.2)，僅少量呈弱陽性表達(7.8);PROKR2在無神經(jīng)節(jié)細胞癥腸壁擴張段呈陽性表達，狹窄段大多表達陰性(98.5)，僅少量呈弱陽性表達(1.5)。
　　3

4、.半定量分析:其一，Prok1、Prok2在無神經(jīng)節(jié)細胞癥狹窄段神經(jīng)叢中平均光密度為(0);Prok1在擴張段神經(jīng)叢中平均光密度為(0)，Prok2在擴張段中平均光密度為（0.14529±0.057628），Prok2在狹窄段和擴張段兩組間表達存在差異，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。其二，PROKR1在狹窄段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.033521±0.012114)，而在擴張段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.31634±0.108397)，

5、兩組存在差異，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01); PROKR2在擴張段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.20781±0.087942)，PROKR2在狹窄段神經(jīng)叢中平均光密度為(0.02058±0.00863)，兩組存在差異，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。其三，在擴張腸管腸壁神經(jīng)節(jié)細胞內，Prok2分別與PROKR1、PROKR2都存在相同表達，呈正相關。其四，PROKR1分別與MAPK、AKT、GDNF都存在相同表達，呈正相關。其五，

6、在無神經(jīng)節(jié)細胞癥擴張段腸管腸壁神經(jīng)節(jié)細胞內，PROKR2分別與MAPK、AKT存在相同表達，呈正相關。
　　結論:
　　1.Prok1在無神經(jīng)節(jié)細胞癥擴張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細胞不存在表達，說明在成熟的神經(jīng)節(jié)細胞或者變異后的神經(jīng)節(jié)細胞中沒有表達，對神經(jīng)節(jié)細胞功能維持無影響;Prok2在無神經(jīng)節(jié)細胞癥擴張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細胞存在表達，提示在調節(jié)神經(jīng)節(jié)細胞發(fā)育中發(fā)揮一定作用。
　　2.Prok2分別與PROKR1、PROKR2在無

7、神經(jīng)節(jié)細胞癥擴張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細胞及神經(jīng)纖維中存在同步表達，說明Prok2通過作用于這兩受體發(fā)揮其調節(jié)腸神經(jīng)節(jié)細胞的發(fā)育。
　　3.PROKR1、PROKR2在無神經(jīng)節(jié)細胞癥擴張段腸壁的神經(jīng)節(jié)細胞及神經(jīng)纖維中存在表達，且與MAPK、AKT、GDNF存在同步表達;提示PROKR1和PROKR2可能通過MAPK/ERK和PI3K/Akt兩條信號通路參與腸神經(jīng)節(jié)細胞的發(fā)育。
　　4.GDNF和PROKR1在無神經(jīng)節(jié)細胞癥擴張段腸壁