甘藍(lán)型油菜與播娘蒿的原生質(zhì)體融合研究.pdf

1、播娘蒿為十字花科播娘蒿屬野生植物，抗逆性極強(qiáng)，種子中亞麻酸含量達(dá)38％以上。本研究擬建立原生質(zhì)體培養(yǎng)和原生質(zhì)體融合體系，以利用播娘蒿進(jìn)行種質(zhì)創(chuàng)新。得到的結(jié)果如下。
　　 1.建立了播娘蒿原生質(zhì)體培養(yǎng)體系
　　 以4℃低溫暗處理24h的播娘蒿愈傷組織為提取原生質(zhì)體的來(lái)源材料，采用B5、Km8p、MS三種培養(yǎng)基對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行液體淺層靜置培養(yǎng)，獲得了愈傷組織并分化成苗，建立了原生質(zhì)體培養(yǎng)體系。結(jié)果表明：低溫暗處理利于獲得高產(chǎn)率

2、高質(zhì)量的原生質(zhì)體；5％纖維素酶+0.5％離析酶+5 mmol/L MES酶解16h，是所設(shè)處理中最佳的酶解處理；B5培養(yǎng)基取得了較好的原生質(zhì)體培養(yǎng)效果；MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/L NAA+1.7mg/L AgNO3為適宜的分化培養(yǎng)基；MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L NAA為適宜的生根培養(yǎng)基。
　　 2.建立了甘藍(lán)型油菜與播娘蒿的原生質(zhì)體融合與植株再生體系
　　 以播娘蒿葉片和甘藍(lán)型油菜子葉

3、為材料提取原生質(zhì)體，采用PEG-高pH（10.5）、高鈣附加DMSO融合方法，液體淺層靜置培養(yǎng)，研究影響播娘蒿與甘藍(lán)型油菜原生質(zhì)體融合的因素，獲得了19株再生植株。結(jié)果表明：4％纖維素酶+0.5％離析酶+5mmol/L MES酶解10h和1％纖維素酶+0.2％離析酶+3 mmol/L MES酶解14h分別適合獲得高產(chǎn)率播娘蒿與油菜原生質(zhì)體；30％PEG+0.3mol/L葡萄糖+50 mmol/LCaCl2·2H2O+15％DMSO獲得了

4、10％的融合率；改良B5培養(yǎng)基的原生質(zhì)體培養(yǎng)效果較好；每次添加不同的新鮮培養(yǎng)基和添加MES對(duì)于防止褐化具有很好的效果；適宜分化培養(yǎng)基為MS+4.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L NAA+5.0mg/L AgNO3；適宜生根培養(yǎng)基為MS+0.1mg/L IBA+0.1mg/L NAA。
　　 3.甘藍(lán)型油菜與播娘蒿體細(xì)胞融合雜種植株的形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)觀察
　　 甘藍(lán)型油菜與播娘蒿的原生質(zhì)體融合獲得的再生植株移栽到田間后