辛伐他汀對鼠平滑肌細胞脂質(zhì)蓄積及CXCL16表達的影響.pdf

1、目的：觀察oxLDL對鼠源平滑肌細胞脂質(zhì)蓄積的影響。觀察辛伐他汀對oxLDL誘導的鼠源平滑肌細胞脂質(zhì)蓄積與影響。觀察辛伐他汀對oxLDL誘導的泡沫細胞CXCL16表達的影響。 方法：采用體外培養(yǎng)的SD大鼠平滑肌細胞作為研究對象，換含0.1％血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)后加處理因素。 　　?、?不同濃度的oxLDL(0、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L)與鼠源平滑肌細胞共同孵育24h和用60mg/L oxLDL與

2、鼠源平滑肌細胞孵育不同時間即(0h、6h、12h、24h、36h)，油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積情況，高效液相色譜分析法檢測細胞總膽固醇蓄積情況，Western blotting檢測平滑肌細胞CXCL16蛋白質(zhì)的表達。 　　?、?用60mg/L oxLDL與不同濃度的辛伐他汀(0uM、1uM、10uM、100uM)共同孵育24h，空白組作為對照組和用60mg/L oxLDL與最佳濃度的辛伐他汀100uM，同時孵育不同的時間即(0

3、h、6h、12h、24h), 空白組作為對照組, 油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積情況，高效液相色譜分析法檢測細胞總膽固醇蓄積情況，Western blotting檢測平滑肌細胞CXCL16蛋白質(zhì)的表達。 結果：Ⅰ.oxLDL誘導的鼠源平滑肌細胞脂質(zhì)蓄積與oxLDL呈劑量依賴性和時間依賴性(P<0.05)。.油紅O染色顯示：與空白對照組和低濃度組比較，較高濃度的oxLDL組(60mg/L、80mg/L)誘導平滑肌細胞較oxLDL低濃

4、度(20mg/L、40mg/L)組胞內(nèi)脂滴明顯增多，體積增大。oxLDL(60mg/L)較長時間(24h、36h) 誘導平滑肌細胞比較短時間(0h、6h、12h) 胞內(nèi)脂滴明顯增多，體積增大。在oxLDL濃度為0、20mg/L、40mg/L、60mg/L、80mg/L時，HPLC檢測的CE/TC的比值分別為(10.78±1.25)％、(24.40±1.84)％、(35.6±2.47)％、(56.16±1.80)％(P<0.01) (57

5、.50±2.47)％, 在60mg/L的oxLDL作用的不同時間即(0h、6h、12h、24h、36h)，HPLC檢測的CE/TC的比值分別為(10.78±1.25)％、(23.78±1.80)％、(36.95±2.39)％、(55.39±2.22)％、(58.89±4.05)％(P<0.05)。 Ⅱ.辛伐他汀能抑制鼠源平滑肌細胞對oxLDL的攝取，油紅O染色可見oxLDL+simvastatin組細胞內(nèi)脂滴較oxLDL組明顯減

6、少，且脂滴顆粒體積變小。在oxLDL(60mg/L)與simvastatin濃度分別為(0uM、1uM、10uM、100uM)時，HPLC檢測的CE/TC的比值分別為(57.28±0.83)％、( 55.06±2.05)％、(46.20±1.44)％、( 17.86±0.97)％.正常組的CE/TC的比值為(10.78±1.25)％(P<0.05). 在oxLDL(60mg/L)與simvastatin(100uM)作用不同的時間組(0

7、h、6h、12h、24h)，HPLC檢測的CE/TC的比值分別為(57.28±0.83)％、(34.74±1.21)％、(25.96±1.31)％、(17.86±0.97)％(P<0.01). Ⅲ.在正常對照組和荷脂細胞(CE/TC<50％)組中，CXCL16蛋白表達無顯著差異性(P>0.05)，而在泡沫細胞(CE/TC>50％)組中，CXCL16蛋白表達顯著增加，CXCL16的表達與細胞泡沫化有關(p<0.05)。辛伐他汀能降