DHA對果糖誘導的肝細胞脂質蓄積的影響及機制研究.pdf

1、目的：果糖攝入增多可引起肝臟內脂質蓄積，進而導致肝臟發(fā)生脂肪變性。有研究發(fā)現(xiàn)ω-3多不飽和脂肪酸(如DHA)對肝臟的脂肪變性有一定的保護作用。本研究擬以原代肝臟細胞體外培養(yǎng)為研究體系，探討DHA是否能夠改善果糖誘導的肝臟脂質蓄積及可能的分子機制。
　　方法：選用正常雄性的C57 BL/6J小鼠，采用肝臟肝門靜脈灌流的方法，獲得肝臟細胞；得到的肝臟細胞分別用果糖、果糖和DHA、DHA、PBA和果糖、TM處理細胞24小時以后進行油紅O

2、染色觀察細胞內紅染脂滴蓄積的情況；Real-time PCR檢測肝細胞內目標基因表達水平；Western blotting檢測肝細胞內 ACC、SREBP、ACOX1、GRP78/BIP、IRE、p-IRE蛋白表達水平。
　　結果：油紅O染色結果表明原代肝細胞在果糖和衣霉素作用下發(fā)生明顯的脂質蓄積，在DHA的作用下細胞內脂質蓄積明顯減少，而果糖和DHA復合處理組細胞內脂質蓄積也明顯減輕，同時PBA預處理后再加入果糖干預肝細胞脂質蓄

3、積明顯減輕；Real-time PCR結果顯示原代肝細胞在果糖和衣霉素作用下FAS、ACC、SREBP、GRP78的mRNA表達水平較對照組明顯上調；DHA處理組FAS、ACC、SREBP、GRP78的mRNA表達水平較對照組無明顯變化，CPT1α、ACOX1明顯上調；果糖和DHA復合處理組FAS、ACC、GRP78的mRNA表達水平較果糖組明顯下調，CPT1α、ACOX1明顯上調；果糖和PBA復合處理組FAS、ACC、SREBP、GR

4、P78的mRNA表達水平較果糖組明顯下調，CPT1α、ACOX1無明顯變化。Western blotting結果提示原代肝細胞在果糖和衣霉素作用下ACC、SREBP、GRP78/BIP、IRE和p-IRE蛋白表達較對照組顯著增強；DHA處理組ACC、SREBP、GRP78/BIP、IRE和p-IRE蛋白表達較對照組無明顯變化，ACOX1蛋白表達明顯增強；果糖和DHA復合處理組與果糖和PBA復合處理組ACC、SREBP、GRP78/BIP