端粒酶測定方法的建立及食管癌與端粒酶相關(guān)關(guān)系的研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文端粒酶測定方法的建立及食管癌與端粒酶相關(guān)關(guān)系的研究姓名：張傳寶申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗診斷學(xué)指導(dǎo)教師：張克堅郭健2002.1.1行了端粒酶活性測定。結(jié)果：1我們選擇的TRAP方法：i、延伸條件：25oC水浴30分鐘：ii、火活端粒酶：90oc保溫3分鐘：ii、PCR條件：900C／45秒，50oC／45秒，72oC／60秒，循環(huán)35次；iii電泳條件：15％聚丙烯酰胺電泳，電壓為150V

2、；2確定的銀染方法：i小心取下凝膠，在100ml的固定液(1O％乙醇，05％乙酸)中固定10分鐘；ii在固定液中加入06％的硝酸銀溶液50ml，使終濃度為02％，染色l0分鐘；iii棄去固定液，用蒸餾水漂洗兩次：一次20秒，一次2分鐘；iii加入200ml冠色液(3％NaOH，05％甲醛)輕輕晃動，直至產(chǎn)物信號足夠強而背景不致過高為止：iv用100ml固定液固定5分鐘，終止反應(yīng)，蒸餾水漂沈10分鐘，照相保存Y／結(jié)合TRAP和銀染建立了測