版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
阿爾茨海默病(Alzheimer'disease,AD),是一種多因素引起的進(jìn)行性致死性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,臨床表現(xiàn)為認(rèn)知和記憶能力不斷惡化,日常生活能力進(jìn)行性減退,并有各種神經(jīng)精神癥狀和行為障礙。老年斑(SPs)和神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFTs)被認(rèn)為是AD關(guān)鍵的病理特征。目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)沉積成為AD發(fā)病過(guò)程中的重要因素,具有關(guān)鍵作用,是各種原因誘發(fā)AD的共同通路。 Aβ具有神經(jīng)毒
2、性,當(dāng)前應(yīng)用Aβ25-35片段誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷建立AD細(xì)胞模型已被廣泛用于體外研究實(shí)驗(yàn)。淫羊藿苷(icaritin,ICA)為小檗科淫羊?qū)僦参镆蜣降闹饕钚猿煞?,具多重藥理學(xué)作用,近年來(lái)淫羊藿苷在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用及其機(jī)制研究日益增多,具有抗癡呆抗衰老、抗抑郁、改善缺血性腦損傷等作用。cAMP反應(yīng)序列結(jié)合蛋白(CREB)是一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子,調(diào)節(jié)啟動(dòng)子中具有環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)單元(CRE)的基因轉(zhuǎn)錄,在神經(jīng)元再生、突觸形成及學(xué)習(xí)
3、記憶等方面具有重要的調(diào)節(jié)作用。腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(NT)家族的重要成員,對(duì)外周和中樞神經(jīng)具有保護(hù)作用,不但能促進(jìn)神經(jīng)元生存、生長(zhǎng)、分化,而且在調(diào)節(jié)突觸傳遞和突觸可塑性方面發(fā)揮重要作用。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),給予神經(jīng)元亞毒性劑量的Aβ1-42,CREB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路受阻,BDNF含量下降,進(jìn)一步導(dǎo)致突觸功能障礙和神經(jīng)元變性。本研究以Aβ25-35誘導(dǎo)損傷P
4、C12細(xì)胞為AD細(xì)胞模型,探討ICA對(duì)其CREB及BDNF表達(dá)的影響。
方法:
1、細(xì)胞培養(yǎng):PC12細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清和含100U/ml青霉素及100U/ml鏈霉素的高糖DMEM培養(yǎng)基中,置于37℃、含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),2天換液一次,藥物干預(yù)及各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)均取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。
2、MTT比色法:實(shí)驗(yàn)分control組、Aβ組、ICA組、LY組、LY+ICA組。除control組外,余下四
5、組Aβ的濃度均為20μmol/L; ICA組:先加ICA孵育1小時(shí)后再加Aβ,ICA濃度為20μmol/L; LY組的LY294002濃度為50μmol/L; LY+ICA組為先加LY294002濃度為50μmol/L孵育1h,再加ICA和Aβ使其濃度為20μmol/L。
3、Western blot檢測(cè):實(shí)驗(yàn)分組同(2),測(cè)定各組p-CREB(Ser133)/CREB、BDNF、p-Akt(Ser473)/Akt的蛋白表達(dá)。
6、
結(jié)果:
1、與control組比較,Aβ25-35處理使PC12細(xì)胞存活率明顯降低,差異有顯著性(P<0.01);與Aβ組比較,ICA預(yù)處理能提高PC12細(xì)胞存活率,差異有顯著性(P<0.01);與ICA組比較,ICA+LY組PC12細(xì)胞存活率下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
2、與Control組比較,Aβ25-35處理使PC12細(xì)胞中P-CREB、BDNF、P-Akt蛋白表達(dá)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)
7、意義(P<0.05);與Aβ組相比,ICA組能夠明顯增加模型細(xì)胞中P-CREB、BDNF、P-Akt蛋白的表達(dá),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與ICA組相比,ICA+LY組P-CREB、BDNF、P-Akt蛋白的表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
結(jié)論:
1.經(jīng)Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞存活率明顯下降。ICA可明顯改善Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞存活率。
2.經(jīng)PI3K/Akt信號(hào)通
8、路抑制劑LY294002作用后,ICA提高PC12細(xì)胞存活率的作用被明顯抑制。提示ICA可能通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路發(fā)揮保護(hù)作用。
3.Aβ25-35能明顯下調(diào)PC12細(xì)胞中P-CREB、BDNF、P-Akt蛋白表達(dá)水平,而ICA干預(yù)后能上調(diào)上述蛋白的表達(dá),發(fā)揮保護(hù)作用。
4.經(jīng)PI3K/Akt信號(hào)通路抑制劑LY294002作用后,ICA上調(diào)上述蛋白表達(dá)的作用被抑制,提示ICA可能通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路,上
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 淫羊藿苷對(duì)AD細(xì)胞模型GSK-3β表達(dá)影響及機(jī)制研究.pdf
- 淫羊藿次苷Ⅱ?qū)β阅X低灌注大鼠GSK3β、CREB和BDNF表達(dá)的影響.pdf
- GR表達(dá)條件性降低細(xì)胞模型的建立及淫羊藿苷對(duì)GR表達(dá)的影響.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)cuprizone誘導(dǎo)的小鼠模型髓鞘再生的影響及機(jī)制研究.pdf
- 淫羊藿苷聯(lián)用三七總皂苷對(duì)AD模型鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及其作用機(jī)制探討.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)炎癥細(xì)胞遷移粘附和血管重構(gòu)的影響及機(jī)制研究.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)COPD模型炎癥反應(yīng)的影響和機(jī)制研究.pdf
- 補(bǔ)腎中藥單體巴戟甲素、女貞苷、淫羊藿苷對(duì)AD模型的保護(hù)作用及機(jī)制探討.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞體外增殖的影響及分子機(jī)制的研究.pdf
- 淫羊藿總黃酮和淫羊藿苷對(duì)衰老的干預(yù)作用及機(jī)制研究.pdf
- 遠(yuǎn)志總皂苷對(duì)AD模型大鼠海馬Ng及pCaMKⅡα表達(dá)的影響.pdf
- 遠(yuǎn)志總皂苷對(duì)AD模型大鼠Ach代謝及細(xì)胞凋亡的影響.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量及功能的影響.pdf
- 遠(yuǎn)志總皂苷對(duì)AD模型大鼠海馬CA1區(qū)BDNF及其受體TrkB表達(dá)的影響.pdf
- 鹽酸多奈哌齊對(duì)AD模型大鼠海馬BDNF表達(dá)的影響.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)大鼠急性缺血性腦卒中模型的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)老年癡呆模型小鼠的病理學(xué)影響及相關(guān)機(jī)制探討.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)卵蛋白和內(nèi)毒素誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的影響及機(jī)制研究.pdf
- PFOS對(duì)神經(jīng)細(xì)胞BDNF-TrkB-CREB信號(hào)通路的影響.pdf
- 淫羊藿苷對(duì)體外培養(yǎng)的雞骨細(xì)胞的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論