PFOS對(duì)神經(jīng)細(xì)胞BDNF-TrkB-CREB信號(hào)通路的影響.pdf

1、全氟辛烷磺酸鹽(Perfluorooctane sulfonate，PFOS)是目前應(yīng)用最廣泛、使用量最大的一種全氟有機(jī)化合物。研究表明，PFOS除了能夠引起肝臟、心臟、肺臟、生殖、免疫等多器官多系統(tǒng)毒性外，還能誘發(fā)神經(jīng)毒性。由于PFOS能通過胎盤屏障和血腦屏障，故其神經(jīng)發(fā)育毒性備受關(guān)注。本研究采用昆明種母鼠圍產(chǎn)期PFOS暴露，建立PFOS的發(fā)育毒性模型，HE染色觀察PFOS暴露對(duì)仔鼠海馬和皮層的影響，QPCR檢測(cè) BDNF/TrkB/

2、CREB信號(hào)通路關(guān)鍵基因的表達(dá)。結(jié)果表明，PFOS暴露損傷海馬組織，造成海馬組織中空泡的出現(xiàn)，同時(shí)降低了BDNF、TrkB、CREB以及突觸相關(guān)蛋白 Syn1和Syp的mRNA水平。除此之外，本實(shí)驗(yàn)還采用PFOS處理SH-SY5Y細(xì)胞，建立PFOS的體外毒性模型，結(jié)果表明，PFOS能抑制SH-SY5Y細(xì)胞的增殖，降低BDNF、TrkB、CREB的表達(dá)，這與體內(nèi)研究的結(jié)果一致。因此，推測(cè)PFOS能干擾神經(jīng)細(xì)胞的BDNF/TrkB/CREB

3、信號(hào)通路，這可能是PFOS神經(jīng)毒性的機(jī)制之一。
　　研究一：圍產(chǎn)期PFOS暴露對(duì)仔鼠海馬BDNF/TrkB/CREB信號(hào)通路的影響
　　目的：觀察圍產(chǎn)期PFOS暴露對(duì)仔鼠海馬BDNF/TrkB/CREB信號(hào)通路關(guān)鍵基因表達(dá)的影響，探討PFOS的神經(jīng)發(fā)育毒性機(jī)制。方法：24只昆明小鼠隨機(jī)分為0、0.1、1.0及5.0mg/kg/d PFOS處理組,從GD2-PND21灌胃染毒。PND21天處死仔鼠，收集腦組織，按要求處理樣本。

4、HE染色觀察腦組織常規(guī)病理情況，QPCR檢測(cè)海馬組織BDNF、TrkB、CREB、Syn1及Syp的mRNA含量；結(jié)果：PFOS暴露造成了仔鼠海馬組織出現(xiàn)空泡，降低了海馬中BDNF、TrkB、CREB以及突觸相關(guān)蛋白Syn1和Spy的mRNA水平；結(jié)論：PFOS干擾BDNF/TrkB/CREB信號(hào)通路，降低突觸相關(guān)蛋白可能是其神經(jīng)發(fā)育毒性機(jī)制之一。
　　研究二：PFOS暴露對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞BDNF/TrkB/CREB信號(hào)通路的

5、影響
　　目的：觀察PFOS暴露對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞損傷和BDNF/TrkB/CREB信號(hào)通路關(guān)鍵基因表達(dá)的影響，探討PFOS神經(jīng)毒性機(jī)制。方法：不同濃度PFOS(0、10、50、100、150、200μM)處理SH-SY5Y細(xì)胞48h，構(gòu)建PFOS的體外毒性模型，MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力，ELISA法檢測(cè)細(xì)胞中BDNF蛋白含量，QPCR法檢測(cè)BDNF mRNA水平，Westren blot法檢測(cè)TrkB、CREB、p-CREB的蛋白