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文檔簡(jiǎn)介
1、氟苯尼考?xì)埩粲趧?dòng)物源性食品中,會(huì)對(duì)人的身體健康造成危害,國(guó)家明確規(guī)定了氟苯尼考的殘留限量。目前氟苯尼考?xì)埩舻臋z測(cè)技術(shù),大多使用LC-MS、HPLC等方法分析檢測(cè),這些方法有一定的優(yōu)點(diǎn),比如假陽(yáng)性率低,檢測(cè)準(zhǔn)確,但同樣具有不可忽視的缺點(diǎn),如樣品前處理程序復(fù)雜,儀器昂貴,用時(shí)長(zhǎng),無(wú)法大批量檢測(cè),需要專業(yè)人員來(lái)操作,面對(duì)獸藥使用量越來(lái)越大,獸藥殘留現(xiàn)象越來(lái)越嚴(yán)重的現(xiàn)狀,這些缺點(diǎn)直接制約了FFC殘留的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),使得食品安全行政執(zhí)法人員無(wú)法對(duì)
2、FFC進(jìn)行有效的監(jiān)督以及監(jiān)測(cè)。本研究旨在建立了動(dòng)物源性FFC殘留快速檢測(cè)的酶免疫方法,以達(dá)到通過(guò)酶免疫法快速準(zhǔn)確定量測(cè)定 FFC殘留。
本研究首先通過(guò)混合酸酐法制備了FFC的完全抗原,通過(guò)紫外分光光度法以及紅外光譜的鑒定,證明完全抗原合成成功。選用新西蘭大白兔作為免疫動(dòng)物,經(jīng)過(guò)5次免疫,獲得高效價(jià)血清,通過(guò)proteinA-sepharuse親和層析法純化血清,經(jīng)過(guò)SDS-PAGE驗(yàn)證,抗體制備成功。其次建立了IC-ELISA
3、法,經(jīng)過(guò)對(duì)多個(gè)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化,建立完整的IC-ELISA檢測(cè)法。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=-0.19943+1.2313,由此推出其 IC50值為4.5μg/mL,檢測(cè)限為0.53ng/mL。再次建立了BA-ELISA法,通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化,建立了完整的 BA-ELISA法,線性方程為y=-0.32216+1.5559,IC50值為1.9μg/mg。檢測(cè)限為0.15ng/mg,兩種方法均對(duì)FFC的結(jié)構(gòu)類似物氯霉素有交叉反應(yīng),對(duì)其他的
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