飽和氫氣生理鹽水對大鼠視網(wǎng)膜藍(lán)光損傷的保護(hù)作用.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分
　　目的:視網(wǎng)膜光損傷,主要與活性氧(ROS)的堆積有關(guān),是 ARMD、RP及其他多種視網(wǎng)膜疾病重要機(jī)制。氫氣是一種選擇性的抗氧化劑,氫氣溶解在液體中可選擇性中和羥自由基和過氧亞硝酸陰離子,而后兩者是氧化損傷最重要的介質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)中,探討飽和氫氣生理鹽水溶液對大鼠視網(wǎng)膜藍(lán)光損傷的作用。
　　方法:取100只健康雌性大鼠(160g-180g),隨機(jī)分為四組。四組大鼠飼養(yǎng)于12

2、H明12H暗環(huán)境中,并可自由攝取飲食。造模期間,一組不做處理,二組及三組按照大鼠體重分別予以1ml/100g生理鹽水和飽和氫氣生理鹽水腹腔注射,四組作為對照組。二十天后,以藍(lán)光照射6小時建立大鼠視網(wǎng)膜光損傷模型。于光照后8小時,16小時和24小時檢測視網(wǎng)膜相關(guān)指標(biāo)。樣本取材后,通過 H-E染色,超微結(jié)構(gòu)觀察,生化指標(biāo)檢測,觀察視網(wǎng)膜損傷程度及飽和氫氣生理鹽水的作用。
　　結(jié)果:通過 H-E檢測發(fā)現(xiàn),一組和二組視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)損傷重,三組

3、損傷輕。一組與二組間無明顯差異。與一組和二組相比,三組的視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)層次清晰,細(xì)胞排列整齊。400倍鏡下可見,除了一組與二組之間,不同時間點(diǎn)各組之間的外核層厚度比較有明顯差異(p<0.05)。三個時間點(diǎn),一組的外核層厚度為30.41±4.04μm,26.11±2.82μm和20.63±1.06μm,二組為31.62±4.54μm,25.08±3.63μm和19.07±3.86μm,三組為29.75±3.62μm,28.83±1.97μm和

4、27.61±1.83μm,四組的平均厚度為37.35±1.37μm。由此得出,隨著時間延長,損傷不斷加重。在24小時時,損傷的差別最大。與四組相比,一組薄46.23％,二組薄50.29％,三組薄28.04％。電鏡下可見,三組損傷明顯較一組和二組輕。在各時間點(diǎn)與四組相比,一組丙二醛的含量明顯增高(p<0.05)。三組丙二醛含量明顯低于一組(p<0.05)和二組(p<0.05)。在一組和二組之間比較,各時間點(diǎn)無明顯差異(p>0.05)。

5、r>　　結(jié)論:檢測的結(jié)果顯示,飽和氫氣生理鹽水能有效的保護(hù)視網(wǎng)膜,減輕光損傷,這種保護(hù)作用跟氫氣的抗氧化作用有關(guān)。這些發(fā)現(xiàn),使氫氣成為治療 ARMD等光損傷導(dǎo)致的氧化應(yīng)激相關(guān)視網(wǎng)膜病變的潛在藥物。
　　第二部分
　　目的:制備飽和氫氣生理鹽水,評估并選擇適用于本實(shí)驗(yàn)的制備方法。
　　方法:比較現(xiàn)今報道過的三種飽和氫氣生理鹽水的制備方法,檢測各種方法的氫氣濃度。檢測飽和氫氣生理鹽水并選擇最簡單有效安全的制備方法。

6、　　結(jié)果:過飽和法是最適用的制備飽和氫氣生理鹽水的方法。在本實(shí)驗(yàn)中以此種方法制備飽和氫氣生理鹽水并用于腹腔內(nèi)注射。
　　結(jié)論:過飽和法是本實(shí)驗(yàn)中合適的研究氫氣的抗氧化作用的方法。飽和氫氣生理鹽水可能是對視網(wǎng)膜光損傷相關(guān)疾病(如ARMD, RP等)的新的治療方法。
　　第三部分
　　目的:探討飽和氫氣生理鹽水對藍(lán)光誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜損傷的作用及其機(jī)制。
　　方法:取100只160g-180g的健康雌性大鼠隨機(jī)分為4組,一

7、組30只僅接受光照,二組30只接受光照及生理鹽水腹腔注射,三組30只接受光照及飽和氫氣生理鹽水腹腔注射,四組10只不做任何處理。生理鹽水及飽和氫氣生理鹽水劑量以大鼠體量計算為1ml/100g。以藍(lán)光照射6小時來建立光損傷模型并于光照撤離后8小時,16小時,24小時取視網(wǎng)膜檢測。使用H-E染色,超微結(jié)構(gòu)觀察和生化指標(biāo)檢測分析視網(wǎng)膜光損傷情況。
　　結(jié)果:H-E染色發(fā)現(xiàn),一組和二組視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)損傷重,三組損傷輕。一組與二組間無明顯差異。

8、與一組和二組相比,三組的視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)層次清晰,細(xì)胞排列整齊。隨著時間延長,損傷不斷加重。在24小時時間點(diǎn),損傷的差別最大。與四組相比,一組薄46.23％,二組薄50.29％,三組薄28.04％。透射電鏡下可見超微結(jié)構(gòu)顯示,三組損傷明顯較一組和二組輕。在各時間點(diǎn)與四組相比,一組丙二醛的含量明顯增高(p<0.05)。三組丙二醛含量明顯低于一組(p<0.05)和二組(p<0.05)。在一組和二組之間比較,各時間點(diǎn)無明顯差異(p>0.05)。飽和