白藜三醇對兔心肌梗死后血管新生的誘導(dǎo)作用.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)首先建立兔急性心肌梗死模型，主要探討術(shù)后白藜三醇慢性給藥對兔心肌梗死后新生血管的誘導(dǎo)作用及可能機(jī)制。
　　 方法：32只新西蘭白兔為實(shí)驗(yàn)對象，隨機(jī)分為假手術(shù)組、手術(shù)對照組、消心痛組、白藜三醇組，每組8只。假手術(shù)組中LAD僅穿線不結(jié)扎，其余兔通過結(jié)扎LAD建立心肌梗死模型。術(shù)后分別給予不同的藥物干預(yù)：假手術(shù)組及手術(shù)對照組予7％酒精3ml，白藜三醇組予白藜三醇3mg/kg（溶于7％酒精3ml），消心痛組予消心痛2.4mg

2、/kg（溶于7％酒精3ml），均灌胃，1次/天。兩周后，分別取各組存活兔心肌梗死區(qū)、非梗死區(qū)、梗死邊緣區(qū)心肌組織標(biāo)本。HE染色、Masson染色法分別觀察梗死區(qū)、非梗死區(qū)心肌組織形態(tài)學(xué)變化并采集圖像，應(yīng)用Image pro plus6.0圖像分析系統(tǒng)計(jì)算各組心肌梗死面積；應(yīng)用免疫組化染色法檢測各組梗死邊緣區(qū)CD34、IGF-1、bFGF的表達(dá)，并以CD34標(biāo)記血管內(nèi)皮，在顯微鏡400×視野下，計(jì)數(shù)MVD； Western-blot法檢測

3、各組梗死邊緣區(qū)IGF-1、bFGF蛋白表達(dá)水平；RT-PCR檢測各組梗死邊緣區(qū)VEGFmRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：1一般情況：32只兔成功制備心梗模型并存活至治療結(jié)束的有27只，總存活率為84.4％。術(shù)中及術(shù)后共有5只兔死亡：術(shù)中1只死于氣胸，1只死于術(shù)后6小時(shí)內(nèi)，1只死于術(shù)后感染（消心痛組）、2只死于心衰惡病質(zhì)（手術(shù)對照組及白藜三醇組各1只）。
　　 2光鏡結(jié)果：①HE染色結(jié)果顯示假手術(shù)組心肌細(xì)胞橫紋及閏盤清晰，纖

4、維結(jié)構(gòu)清楚、排列整齊、無炎性細(xì)胞浸潤。未梗死部位的心肌細(xì)胞排列整齊緊密，肌纖維走向明晰，細(xì)胞分界清楚，胞核橢圓形位于中央，胞質(zhì)呈嗜酸性均勻染色，而梗死區(qū)室壁變薄，外膜至內(nèi)膜間心肌纖維數(shù)量減少，肉芽組織、纖維組織和脂肪組織增生明顯，各種細(xì)胞排列紊亂，少量散在的心肌細(xì)胞。②Masson染色結(jié)果示梗死部位纖維結(jié)締組織呈藍(lán)色，正常心肌纖維呈紫紅色或深紅色。
　　 3心肌梗死面積測算結(jié)果：白藜三醇組、消心痛組梗死面積明顯小于手術(shù)對照組(P

5、＜0.05)，白藜三醇組與消心痛組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4免疫組化染色測定各組心肌梗死邊緣區(qū)MVD、IGF-1、bFGF結(jié)果：CD34、IGF-1、bFGF三者陽性表達(dá)在顯微鏡下呈黃褐色。白藜三醇組、消心痛組較假手術(shù)組、手術(shù)對照組能明顯增加MVD及IGF-1、bFGF的表達(dá)(P＜0.05)；手術(shù)對照組較假手術(shù)組MVD、IGF-1表達(dá)增加(P＜0.05)，但bFGF表達(dá)兩組之間無明顯變化(P＞0.05)；白藜三醇組IGF-

6、1的表達(dá)水平較消心痛組明顯增加(P＜0.05)，MVD、bFGF兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 5 Western-Blot測定各組心肌梗死邊緣區(qū)IGF-1、bFGF結(jié)果：白藜三醇組、消心痛組較假手術(shù)組、手術(shù)對照組能明顯增加IGF-1、bFGF的表達(dá)（P＜0.05）；手術(shù)對照組較假手術(shù)組、白藜三醇組較消心痛組IGF-1表達(dá)均增加(P＜0.05)，但手術(shù)對照組較假手術(shù)組、白藜三醇組較消心痛組bFGF表達(dá)無明顯變化(P

7、＞0.05)。
　　 6 RT-PCR測定各組心肌梗死邊緣區(qū)VEGF-AmRNA表達(dá)水平：白藜三醇組、消心痛組同假手術(shù)組、手術(shù)對照組比較明顯增加(P＜0.05)，手術(shù)對照組較假手術(shù)組明顯增加(P＜0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；白藜三醇組與消心痛組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 7相關(guān)分析結(jié)果：四組兔心肌梗死邊緣區(qū)IGF-1、bFGF免疫組化結(jié)果與MVD均成正相關(guān)（r=0.913，P＜0.01；r=0.9

8、69，P＜0.01）；MIS與MVD成負(fù)相關(guān)(r=-0.551,P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1.在缺血缺氧環(huán)境下，機(jī)體可啟動(dòng)心肌梗死邊緣區(qū)的血管生成，但作用強(qiáng)度有限。
　　 2.白藜三醇與消心痛均可促進(jìn)心肌梗死后邊緣區(qū)血管生成，有利于冠脈側(cè)枝循環(huán)的建立，減小心梗面積。
　　 3.白藜三醇誘導(dǎo)血管發(fā)生與多種血管生長因子表達(dá)增多相關(guān)，且其作用機(jī)制與消心痛不完全相同，其中介導(dǎo)IGF-1高表達(dá)可能是其重要作用機(jī)制之一。