腰椎間盤髓核細胞活性與MRI退變分型的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景和目的
　　 退行性椎間盤疾病是脊柱外科最常見的病變之一，其退變過程緩慢進展。根本病因尚未明確，目前所知椎間盤退變是在多種機制及細胞因子的共同作用下，椎間盤內(nèi)的生化結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，包括：椎間盤細胞的活性降低，髓核內(nèi)水分丟失，組織成份發(fā)生改變，退變時椎間盤中蛋白多糖、糖胺聚糖下降，含水量減少。因椎間盤形態(tài)和生化結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，其緩沖、分散壓力傳導的能力下降，機械性能發(fā)生改變。有動物實驗研究證明，髓核細胞活性的降低是椎間盤退變

2、的重要特點。隨著年齡的增長，椎間盤內(nèi)的脊索細胞消失，類軟骨細胞活性降低，同時伴有細胞外基質(zhì)分泌減少，膠原成分改變，這些改變使得髓核細胞分泌外基質(zhì)的能力降低，無法維持正常的椎間盤內(nèi)部環(huán)境的平衡，正常的椎間盤結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞，最終導致其機械結(jié)構(gòu)的失穩(wěn)。
　　 在臨床工作中，很難對微觀的生物學進行直接評估。隨著影像學技術(shù)的發(fā)展，MRI已經(jīng)成為各級別醫(yī)院常規(guī)的檢查手段之一，其已被公認為目前診斷椎間盤退變最合理精確的手段。近年來出現(xiàn)了很多基于

3、MRI的椎間盤退變分型，其中最廣泛被接受的MRI退變椎間盤分級為Pearce制定的五分級法，是目前能較好反應(yīng)椎間盤退變的分類方法。
　　 本研究通過實驗，對不同退變程度腰椎間盤的髓核細胞進行培養(yǎng)及活性測定，明確髓核細胞活性與MRI退變分型的相關(guān)性。
　　 方法
　　 實驗共取腰椎間盤髓核組織20例，均為我科收治單一手術(shù)節(jié)段患者，其中A組2例，為正常椎間盤髓核組織(PearceⅠ&Ⅱ型，脊柱外傷患者，年齡為22歲和

4、24歲)；B、C、D三組分別6例，分別為MRI分型輕、中、重度(PearceⅢ型，Ⅳ型，V型患者)退變椎間盤髓核組織(患者年齡在3545歲之間)，均在同樣條件下進行體外髓核細胞分離培養(yǎng)。
　　 術(shù)中取得腰椎間盤髓核組織送入實驗室，進行髓核細胞的分離與原代培養(yǎng)，實驗過程采用傳一代細胞，消化原代細胞計數(shù)后定量分置于培養(yǎng)板培養(yǎng)，于5d，10d，15d，20d，25d五個時間段消化用以細胞計數(shù)法和MTT比色法檢測細胞活性。
　　

5、 結(jié)果
　　 細胞計數(shù)結(jié)果：傳一代髓核細胞計數(shù)在同時間點上A組明顯高于B、C、D組，B組與C、D組之間存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，C組和D組之間細胞計數(shù)無統(tǒng)計學差異，細胞計數(shù)的峰值出現(xiàn)在第20天。
　　 MTT法測定結(jié)果：B、C、D組之間OD值(吸光值)在同時間點，各組之間均存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，退變細胞OD值峰值出現(xiàn)在第20天，此后開始下降，提示細胞活性降低；正常髓核細胞OD值下降出現(xiàn)在25天之后。