靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景和目的：血管成形術(shù)后管壁損傷，血管平滑肌細(xì)胞受牽張激活，大量表達(dá)整合素αvβ3受體，為藥物靶向治療提供了大量的靶點(diǎn)。多肽中RGD基序是多種整合素的識(shí)別位點(diǎn)，因其相對(duì)分子質(zhì)量小、活性穩(wěn)定、易于制備，且無免疫原性等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用于藥物靶向輸送系統(tǒng)。本項(xiàng)研究旨在對(duì)前期已構(gòu)建的荷載醋酸地塞米松的脂質(zhì)體進(jìn)行PEG化修飾，并以攜帶RGD環(huán)五肽作為整合素αvβ3受體的靶向配基，探討整合素αvβ3受體靶向長(zhǎng)循環(huán)載藥脂質(zhì)體的其表觀特征、醋酸地塞米

2、松的體外釋放特點(diǎn)、體外靶向能力及對(duì)血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響等。為進(jìn)一步體內(nèi)靶向?qū)嶒?yàn)提供依據(jù)，并為最終構(gòu)建一種抗內(nèi)膜增生的靶向納米藥物載體奠定基礎(chǔ)。
　　 方法和結(jié)果：本項(xiàng)研究共分兩部份：第一部份整合素αvβ3受體靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的制備及表征分析，本部分研究使用人工合成RGD環(huán)五肽作為靶向分子探針，采用高壓均質(zhì)法制備整合素αvβ3受體靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體，通過激光粒徑分析儀、掃描電鏡和高效液相色譜分析方法，分析靶向脂質(zhì)體的表觀

3、特征和在體外溶出條件下的藥物釋放特點(diǎn)。結(jié)果表明：靶向載藥脂質(zhì)體粒徑為(175±6)nm，藥物包封率為(96.33±
　　 1.02)％，體外溶出時(shí)間超過5天。第二部份靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體體外靶向性實(shí)驗(yàn)研究，本部分研究采用植塊塊貼壁法原代培養(yǎng)臍動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞，經(jīng)流式細(xì)胞技術(shù)分析靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體對(duì)臍動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的整合素αvβ3受體特異性標(biāo)記能力；采用MTT法分析靶向載藥脂質(zhì)體荷載藥物對(duì)血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制能力。

4、結(jié)果表明：空白組熒光陽性細(xì)胞百分比為(0.63±0.05)％，非靶向脂質(zhì)體組標(biāo)記的熒光陽性細(xì)胞百分比為(22.20±3.10)％，靶向脂質(zhì)體組(66.70±14.90)％，即制備的靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體能與血管平滑肌細(xì)胞特異性結(jié)合。醋酸地塞米松對(duì)血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制呈劑量依賴性，5～20ug/ml濃度對(duì)血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)無明顯抑制作用，濃度達(dá)到50ug/ml和100ug/ml時(shí)在24h和48h正常培養(yǎng)條件下，與對(duì)照組相比對(duì)血管平滑肌細(xì)胞

5、增殖有抑制作用(P < 0.05)。理論攜藥量相同的整合素αvβ3受體靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體對(duì)平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用強(qiáng)于非靶向組載藥脂質(zhì)體和單純藥物(單純藥物組0.770±0.041非靶向組0.739±0.040，靶向組0.683±0.037，P < 0.05)。
　　 結(jié)論：整合素αvβ3受體靶向載藥長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體，具有較高的藥物包封率及緩釋性，能與血管平滑肌細(xì)胞整合素αvβ3受體特異性結(jié)合，荷載藥物醋酸地塞米松對(duì)血管平滑肌細(xì)胞