蛋白聚糖對牙本質(zhì)粘接界面穩(wěn)定性的影響及作用機制研究.pdf

1、由于粘接技術(shù)的不斷提高,口腔粘接學在近幾十年得到了長足發(fā)展,牙釉質(zhì)粘接技術(shù)已經(jīng)相當成熟。但由于牙本質(zhì)基質(zhì)的復雜多樣性,牙本質(zhì)粘接界面的耐久性依然是該研究領(lǐng)域一個無法突破的瓶頸問題。
　　牙本質(zhì)粘接界面穩(wěn)定性是影響修復體成功與否的關(guān)鍵因素,粘接樹脂滲透不完全、混合層形成質(zhì)量低、未完全聚合樹脂單體的水解和混合層底部裸露膠原的降解等因素均會加速粘接界面的老化退變。國內(nèi)外學者進行了大量實驗室研究,通過提高粘接劑的轉(zhuǎn)化率、促進膠原分子的交聯(lián)

2、、抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的作用、粘接界面的仿生再礦化等一系列方法試圖改善牙本質(zhì)粘接界面的穩(wěn)定性,雖然取得了一定成效,但都無法從根本上解決粘接耐久性低的問題,因此,仍需尋求新的突破口。
　　近年來的研究發(fā)現(xiàn),牙本質(zhì)非膠原蛋白(noncollagen protein,NCP)成分參與牙本質(zhì)粘接過程,而蛋白聚糖(Proteoglycans,PGs)作為其中主要的組成部分也受到廣泛關(guān)注,但對其作用的具體機制尚不明確。本課題旨在前期工作的基礎(chǔ)上

3、,分別去除脫礦牙本質(zhì)中的糖胺聚糖側(cè)鏈(Glycosaminoglycans,GAGs)和完整PGs分子,評估PGs及其不同結(jié)構(gòu)在樹脂-牙本質(zhì)粘接過程及粘接耐久性中發(fā)揮的作用,并通過比較去除GAGs和PGs前后膠原纖維顯微形貌、水合性能及脫礦牙本質(zhì)表面潤濕性、滲透性的差異,分析GAGs/PGs在牙本質(zhì)粘接中的作用機制,為提高牙本質(zhì)粘接耐久性開辟一條新的思路。
　　主要研究方法:
　　1)牙本質(zhì)片酸蝕后分別使用硫酸軟骨素酶ABC

4、和胰蛋白酶去除 GAGs和PGs,再各自應(yīng)用兩種全酸蝕粘接劑常規(guī)粘接處理,通過微拉伸粘接強度測試、斷裂模式分析和粘接界面微觀形貌觀察,比較 GAGs和PGs去除前后牙本質(zhì)與不同種類全酸蝕粘接劑的即刻粘接性能。
　　2)利用人工唾液浸泡和酶降解兩種方法模擬老化條件,通過微拉伸粘接強度測試、粘接界面微觀形貌觀察、納米滲漏分析等方法評估 GAGs和PGs在維持牙本質(zhì)粘接界面穩(wěn)定性中發(fā)揮的作用。
　　3)借助場發(fā)射掃描電鏡、激光共聚

5、焦顯微鏡和FV10- ASW3.1 Viewer分析軟件,比較去除GAGs和PGs前后牙本質(zhì)在不同潤濕狀態(tài)下其表面膠原纖維的微觀形貌和脫礦基質(zhì)厚度的變化,分析 GAGs和PGs在維持膠原纖維空間結(jié)構(gòu)和脫礦牙本質(zhì)水合性能方面發(fā)揮的作用。
　　4)采用接觸角測試儀、場發(fā)射掃描電鏡結(jié)合EDX元素分析等多種手段,分別對兩種全酸蝕粘接劑在去除 GAGs和PGs前后牙本質(zhì)表面的潤濕性和滲透性進行比較,探討GAGs和PGs在牙本質(zhì)粘接過程及耐久

6、性中發(fā)揮作用的機制。
　　主要研究結(jié)論:
　　1)牙本質(zhì) PGs參與牙本質(zhì)的粘接過程,且其不同結(jié)構(gòu)在粘接中發(fā)揮不同的作用:去除GAGs使牙本質(zhì)與受試全酸蝕粘接劑的即刻粘接強度降低,而完全去除PGs可提高其即刻粘接強度。
　　2)去除GAGs雖然降低了牙本質(zhì)的即刻粘接強度,但在水存老化和酶解老化過程中其粘接強度與對照組相比無顯著差異(P>0.05),老化處理后其粘接強度的下降率顯著低于對照組,且在水存老化12個月的過程中

7、能始終保持粘接界面的完整性和混合層的質(zhì)量,提示去除牙本質(zhì)GAGs能在一定程度上減緩牙本質(zhì)粘接界面的老化過程。
　　3)完全去除 PGs分子不但能顯著提高牙本質(zhì)的即刻粘接強度,水存老化和酶解老化后牙本質(zhì)的粘接強度也顯著高于對照組(P<0.05),且能顯著減少粘接界面納米滲漏的程度,提示去除牙本質(zhì)PGs可顯著增強牙本質(zhì)粘接界面的耐老化能力。
　　4)脫礦牙本質(zhì)完全去除PGs后膠原網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)發(fā)生塌陷,潤濕狀態(tài)時膠原纖維間隙增大;而去

8、除GAGs后膠原纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)塌陷,潤濕狀態(tài)下膠原纖維間隙變化不大,PGs的剩余結(jié)構(gòu)仍充填與于膠原網(wǎng)狀間隙中,提示GAGs和PGs在維持膠原纖維的三維空間形貌方面發(fā)揮重要作用。推測去除GAGs后即刻粘接強度的下降可能與膠原纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的變化和PGs剩余結(jié)構(gòu)的存在有關(guān)。
　　5)牙本質(zhì)GAGs和PGs的存在影響脫礦牙本質(zhì)表面的水合性能和粘接性能。去除GAGs和PGs均能顯著降低牙本質(zhì)膠原的水合性能;完全去除PGs可顯著提高全酸蝕粘接劑