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1、本課題采用分子生物學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)方法對(duì)胰腺癌細(xì)胞株中PAPSS2及PDCD2基因的表達(dá)、功能及其與胰腺癌耐藥的相關(guān)性進(jìn)行了初步研究.方法:以人胰腺癌細(xì)胞株AsPC-1、Capan-1、MiaPaCa-2、PANC-1、P3、SW1990,人胰腺癌耐藥細(xì)胞株SW1990/Fu和SW1990/ADM為主要實(shí)驗(yàn)對(duì)象,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT
2、-PCR)檢測(cè)該8株胰腺癌細(xì)胞株中PAPSS2及PDCD2基因在mRNA水平上的表達(dá).以SW1990、SW1990/Fu和SW1990/ADM 3株人胰腺癌耐藥細(xì)胞株為研究對(duì)象,應(yīng)用RNA干擾(RNA interference,RNAi)和反義寡核苷酸技術(shù)(AntisenseOligodeoxynucleotide,ASODN)分別干擾PAPSS2和PDCD2基因的表達(dá),并用MTT法檢測(cè)干擾前后細(xì)胞對(duì)化療敏感性的改變.結(jié)論:(1)8株胰
3、腺癌細(xì)胞中,PAPSS2基因存在不同水平的表達(dá);耐藥細(xì)胞株SW1990/Fu的PAPSS2表達(dá)較親本株略有升高(P>0.05);SW1990/ADM的PAPSS2表達(dá)較親本株升高(P<0.05).(2)8株胰腺癌細(xì)胞中,PDCD2基因的表達(dá)水平也各不相同;耐藥細(xì)胞株SW1990/Fu和SW1990/ADM的PDCD2表達(dá)分別較親本株略有下降(P>0.05).(3)RNAi導(dǎo)致PAPSS2基因表達(dá)明顯上升(P<0.05)后,細(xì)胞對(duì)5-Fu
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