α-黑素細(xì)胞刺激素新型類(lèi)似物對(duì)內(nèi)毒素休克小鼠的保護(hù)作用.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文α黑素細(xì)胞刺激素新型類(lèi)似物對(duì)內(nèi)毒素休克小鼠的保護(hù)作用姓名：應(yīng)楹申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：田野蘋(píng)20050501第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文甜黑素細(xì)胞刺激素新型類(lèi)似物對(duì)內(nèi)毒素休克小鼠的保護(hù)作用【摘要】目的設(shè)計(jì)對(duì)黑皮質(zhì)素受體(MCIR、MC5R)有高選擇性的Q黑素細(xì)胞刺激素(aMSH)新型類(lèi)似物，評(píng)價(jià)其對(duì)內(nèi)毒素休克小鼠的保護(hù)作用。方法用InsightII軟件構(gòu)建類(lèi)似物的3D結(jié)構(gòu)，由吉爾生化有限公司完成多肽的

2、合成。以aMSH及其類(lèi)似物對(duì)LPS刺激的THP1細(xì)胞產(chǎn)生TNFa的變化作為體外篩選。采用放射性配體結(jié)合分析測(cè)定類(lèi)似物對(duì)受體的親和力，檢測(cè)cAMP水平確定其激動(dòng)劑或拮抗劑屬性。BALB／cJ、鼠經(jīng)腹腔注射1pgLPs和20mgDGal建立內(nèi)毒素休克模型，30minl勾分別給予25mg／kg∞MsH及其類(lèi)似物。采取小鼠眼眶血收集血清分別測(cè)定TNFo[、IL1B、NO。觀察生存情況，取主要臟器做常規(guī)組織病理檢查。結(jié)果多肽39能明顯抑$4LVS

3、刺激THP1細(xì)胞分泌耵qFa(，如01)，對(duì)MClR和MC5R有較高的選擇性，尤其是對(duì)MC5R表現(xiàn)出較強(qiáng)的親和力。cAMP水平測(cè)定顯示多肽39是MCIR、MC3R、MC4R、MC5R激動(dòng)劑，多肽39能延長(zhǎng)內(nèi)毒素休克小鼠存活時(shí)間，顯著降低TNFⅡ，IbllB和NO水平(P001)，并減輕重要臟器的炎癥損傷。結(jié)論多肽39是一種MCIR和MC5R高選擇性的新型激動(dòng)劑，對(duì)內(nèi)毒素休克小鼠有顯著的保護(hù)作用。關(guān)鍵詞：∞黑素細(xì)胞刺激素，類(lèi)似物。內(nèi)毒素體

4、克，黑皮質(zhì)素受體，親和力ProtectiveE玨如tofaNovelaMelanocyteStimulatingHormoneAnalogueonMouseModelforEndotoxicShock[Abstract]ObjectiveTodesignMClandMC5receptorselectiveaMSHanalogues，andevaluatetheirprotectiveeffectonthemousemodelforend

5、otoxicshockMethodsThesoftwareofInsight]1wasusedtodesignCtMSHanalogues，whichweresynthesizedbyGLBiochemLimitedCompanyTHP—IcellswereincubatedwithnMSHOFsymhaicpeptideswhilestimulationwithLPSThesupematantconcentrationofTNF—cL

6、wastestedbyELISAkitKivaluesofctMSHandsyntheticpeptideswithhumanMCl，MC3，MC4，andMC5receptorswereobtainedincompetitionwith[125I]NDPMSHforaffinitystudiesThecyclicAMPlevelwastestedbvf3HIcyclicAMPkitEndotoxicshockwasmodeledbye