四環(huán)素誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝的生化機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　非酒精性脂肪肝是指排除了酒精及其他明確導(dǎo)致肝臟損傷的因素外，以甘油三酯為主的脂類(lèi)物質(zhì)在肝細(xì)胞內(nèi)過(guò)度堆積而形成的臨床病理綜合征。已有數(shù)據(jù)表明，四環(huán)素能夠促進(jìn)脂肪堆積，并且和非酒精性脂肪肝、線(xiàn)粒體功能障礙有著密切聯(lián)系，但是具體機(jī)制仍不清楚。氧化應(yīng)激作為非酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中的重要參與者，和四環(huán)素的作用過(guò)程也存在著一定的聯(lián)系。因此，本文將從氧化應(yīng)激的角度揭示四環(huán)素誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝的具體生化機(jī)制。
　　方法:

2、　　(1)以成年雄性SD大鼠(170-190g)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，建立大鼠非酒精性脂肪肝模型，通過(guò)生化分析來(lái)探索四環(huán)素能否促進(jìn)脂肪酸向肝內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、促進(jìn)氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化、以及其他相關(guān)生化機(jī)制;
　　(2)結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法，分析大鼠非酒精性脂肪肝模型肝臟的羰基化蛋白組的變化，從分子水平揭露四環(huán)素誘導(dǎo)脂肪肝的發(fā)病機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　(1)經(jīng)四環(huán)素處理48小時(shí)后，肝內(nèi)甘油三酯和總膽固醇含量明顯升高，而血漿中的含量明

3、顯降低;四環(huán)素孵育HepG2細(xì)胞同樣能夠使得細(xì)胞內(nèi)甘油三酯增加。
　　(2)經(jīng)四環(huán)素處理后，相關(guān)氧化應(yīng)激指標(biāo)和肝炎癥指標(biāo)都有所上升，且與肝內(nèi)脂肪酸的增加呈正相關(guān)。
　　(3)通過(guò)對(duì)大鼠非酒精性脂肪肝模型肝內(nèi)羰基化蛋白組學(xué)分析，鑒定到了26種氧化應(yīng)激的目標(biāo)蛋白，更重要的是其中一半以上的蛋白分子是位于線(xiàn)粒體內(nèi)，三分之二以上的功能蛋白參與了脂代謝和能量代謝。在這些氧化應(yīng)激敏感型蛋白中，長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACADL)是唯一一種位

4、于線(xiàn)粒體內(nèi)、同時(shí)調(diào)控β-氧化的蛋白酶。雖然對(duì)照組和四環(huán)素處理組之間ACADL的蛋白表達(dá)量沒(méi)有明顯區(qū)別，但四環(huán)素處理導(dǎo)致ACADL的氧化修飾加劇和酶活抑制。
　　結(jié)論:
　　(1)四環(huán)素可以促進(jìn)脂肪酸向肝內(nèi)運(yùn)輸并聚集，最終成功使SD大鼠患非酒精性脂肪肝，目前為止，這可以作為一種簡(jiǎn)便快捷的模擬脂肪肝造模的方法。
　　(2)四環(huán)素導(dǎo)致的脂肪含量的升高，進(jìn)一步使得氧化應(yīng)激水平的上調(diào)，細(xì)胞損傷的加劇。
　　(3)四環(huán)素引起