蛋白酪氨酸磷酸酶PTPσ小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)及其作用機(jī)理研究.pdf

1、PTPσ(Protein Tyrosine Phosphatase sigma)是蛋白酪氨酸磷酸酶(ProteinTyrosine Phosphatases，PTPs)家族中一個(gè)重要的受體型酪氨酸磷酸酶，在神經(jīng)損傷后再生中發(fā)揮著重要的負(fù)調(diào)控作用，是治療神經(jīng)損傷的潛在新靶標(biāo)。目前還沒(méi)有關(guān)于PTPσ抑制劑的報(bào)道。因此，尋找和開(kāi)發(fā)高親和性、高生物利用度、高選擇性的PTPσ抑制劑將為研究和治療神經(jīng)損傷提供新的理論和方法。
　　 我們建立

2、了PTPσ抑制劑的高通量篩選模型，首先對(duì)國(guó)家新藥篩選中心化合物樣品庫(kù)67472個(gè)化合物進(jìn)行了高通量篩選，然后與其他課題組合作進(jìn)行了篩選。通過(guò)這些篩選，我們發(fā)現(xiàn)了一系列PTPσ抑制劑，其中某些抑制劑的IC50值小于1μM。最后我們以GM446-2為代表對(duì)GM系列的化合物進(jìn)行了性質(zhì)及機(jī)理研究。抑制劑選擇性研究證明，該抑制劑既抑制鼠源PTPσ，又抑制人源PTPσ；既抑制胞內(nèi)催化區(qū)全長(zhǎng)片段，又抑制胞內(nèi)催化區(qū)截短片段。抑制劑類(lèi)型研究發(fā)現(xiàn)，GM44

3、6-2為非競(jìng)爭(zhēng)型抑制劑。結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究表明，該抑制劑位于兩個(gè)蛋白分子活性中心相對(duì)而形成的口袋中，通過(guò)氫鍵及苯環(huán)間的π鍵與兩個(gè)蛋白分子相互作用，可能通過(guò)別構(gòu)調(diào)節(jié)作用阻礙PTPσ對(duì)底物的催化，從而抑制PTPσ的活性。
　　 綜上所述，本論文的研究工作建立了PTPσ抑制劑的高通量篩選模型，第一次發(fā)現(xiàn)了PTPσ小分子抑制劑，并從生物化學(xué)及結(jié)構(gòu)生物學(xué)的角度闡明了抑制劑的作用機(jī)理，為進(jìn)一步化合物結(jié)構(gòu)改造及化合物的體內(nèi)生物活性評(píng)價(jià)奠定了基礎(chǔ)，