微囊化PC12細(xì)胞移植對(duì)慢性神經(jīng)源性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文微囊化PC12細(xì)胞移植對(duì)慢性神經(jīng)源性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制研究姓名：伍少玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：康復(fù)醫(yī)學(xué)與理療學(xué)指導(dǎo)教師：燕鐵斌20090520微囊化PCI2細(xì)胞移植對(duì)慢性神經(jīng)源性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及其機(jī)制研究2探討微囊化對(duì)PCI2細(xì)胞分泌的影響。3探討微囊化PCI2細(xì)胞移植入慢性神經(jīng)源性疼痛模型大鼠蛛網(wǎng)膜卜腔后的鎮(zhèn)痛效果及其機(jī)制。4探討移植后的微囊化PCI2細(xì)胞的致瘤性。方法1PCI2細(xì)胞的傳代培養(yǎng)及基礎(chǔ)分泌

2、功能的檢測(cè)PCI2細(xì)胞在DMEM(PH74，高糖)15％胎牛血清中，按l：2傳代培養(yǎng)。每個(gè)培養(yǎng)皿約含25106個(gè)細(xì)胞，收集培養(yǎng)液，采用高效液相色譜一電化學(xué)檢測(cè)法檢測(cè)去甲腎上腺素(NE)的濃度；采用放射免疫法檢測(cè)甲硫氨酸腦啡肽(MEK)的濃度。2PCI2細(xì)胞PENK基因的表達(dá)采用RTPCR方法檢測(cè)PCI2細(xì)胞PENKmRNA的表達(dá)情況。3微囊化PCI2細(xì)胞的制作及分泌情況檢測(cè)采用海藻酸鈉、多聚賴(lài)氨酸和海藻酸鈉制作APA微囊，并包裹PCI2

3、細(xì)胞。微囊化PCI2細(xì)胞在上述培養(yǎng)液中生長(zhǎng)，并采用相同方法檢測(cè)培養(yǎng)液中NE和MEK的濃度。4疼痛模型大鼠制作與蛛網(wǎng)膜F腔微創(chuàng)置管采用Kim模型(L5神經(jīng)結(jié)扎)制作慢性神經(jīng)源性疼痛模型大鼠；同時(shí)，采用PE50導(dǎo)管插入大鼠的蛛網(wǎng)膜I卜腔并留置和固定。5實(shí)驗(yàn)分組及干預(yù)采用機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏試驗(yàn)和斜板試驗(yàn)篩選符合條件的疼痛大鼠。將符合條件的大鼠隨機(jī)分成三組，微囊化PCI2細(xì)胞組(APA—PCI2組，n16只)、裸PCI2細(xì)胞組(n=15只)和空微囊